Процес |
Додаткова послуга |
Сервісні деталі |
Термін доставки (робочий день) |
Доставні |
Проектування та оптимізація послідовності мРНК |
Проектування та оптимізація послідовностей кодування |
Дизайн послідовності CDS та оптимізація кодонів |
1-3 |
Файл послідовності |
Проектування та оптимізація некодуючих послідовностей |
Проектування та оптимізація UTR, polyA послідовностей |
Приготування плазміди шаблону транскрипції |
Приготування рекомбінантної плазміди |
Синтез генів |
7-10 |
Ампліфікація та екстракція плазмід |
4 |
Лінеаризація та очищення плазмід |
Транскрипція мРНК in vitro |
Котранскрипційне обмеження (одноетапний метод) |
Транскрипція in vitro (IVT) / Cap аналог |
1-2 |
N / A |
Модифікації нуклеотидів (модифікації UTP/CTP) |
Видалення шаблону ДНК (DNase I) |
Ферментативне обмеження (двоетапний процес) |
IVT |
2-3 |
Модифікації нуклеотидів (модифікації UTP/CTP) |
Видалення шаблону ДНК (DNase I) |
Очищення мРНК (хлорид літію/магнітні кульки) |
Ферментативне укупорювання |
Очищення мРНК |
Звичайна схема очищення |
Осадження хлориду літію |
1 |
мРНК лікарська речовина |
Очищення магнітними кульками |
Схема очищення хроматографічної колонки |
Комбінація кількох методів хроматографії |
1-2 |
Буферний обмін |
Ультрафільтрація |
1 |
Ліофілізація мРНК |
Ліофілізація |
Попереднє заморожування |
2-3 |
мРНК ліофілізований порошок |
Первинна сушка (сублімація) |
Вторинна сушка (десорбція) |
Інкапсуляція мРНК |
Інкапсуляція LNP |
Інкапсуляція LNP |
2-3 |
продукт мРНК-LNPDrug |
Концентрація та буферний обмін |
Аналіз якості мРНК |
мРНК лікарська речовина/ ліофілізований порошок |
Концентрація, чистота |
1 |
Протокол випробування |
Цілісність, ефективність укупорки, розподіл хвоста polyA |
2-5 |
мРНК-LNP лікарський продукт |
Ефективність інкапсуляції |
1 |
Розмір і розподіл частинок |
Поверхневий заряд |
Перевірка експресії мРНК |
Оцінка клітин 293T |
Осередкове покриття |
4 |
Транзиторна трансфекція клітин |
Спостереження сигналу флуоресценції |
1-3 |
Вестерн-блот (WB)/Імуноферментний аналіз (ELISA) |