Продукти, отримані шляхом циклізації in vitro та збагачення РНКази R, вимагають подальшого видалення з транскрипції in vitro (IVT), включаючи неспожиті субстрати в реакції циклізації, побічні продукти реакції та розрізану РНК.
Yaohai Bio-Pharma має зріле осадження LiCl, очищення магнітними кульками, власно розроблену систему очищення та інші різноманітні рішення для очищення для ефективного видалення різноманітних домішок і підготовки високочистої circRNA.
Розчин для очищення невеликих кількостей circRNA для трансфекції клітин і як частина експериментів на тваринах.
Розчин для очищення невеликих кількостей circRNA для трансфекції клітин і як частина експериментів на тваринах.
Сценарії застосування з вищою якістю;
Стабільний і масштабований процес очищення відповідно до вимог GMP.
Процес | Додаткова послуга | Сервісні деталі | Період доставки (день) | Очікувані результати |
очищення циркулярної РНК | Традиційний очисний розчин | Осадження хлориду літію | 1 | лікарська речовина circRNA |
Очищення магнітними кульками | ||||
Очищення circRNA високої чистоти | Препаративна високоефективна рідинна хроматографія (ВЕРХ) | 1-2 | ||
Буферний обмін | Ультрафільтрація | 1 | ||
circRNA контроль якості | Концентрація / очищення | Ультрафіолетова (УФ) спектрофотометрія | 0.5 | Протокол випробування |
Чистота | Електрофорез у агарозному гелі (AGE)/E-gel | |||
HPLC-опціонально | 1 |
Сценарії застосування можуть бути досягнуті.
circRNA з чистотою більше 90%;
Завдяки суворому контролю РНКаз в експериментальному середовищі та витратних матеріалах ефективно запобігається деградації РНК.
Yaohai Bio-Pharma розробила зрілий розчин для очищення circRNA, який може ефективно видаляти різноманітні домішки, пов’язані з процесом.
Продукти кільцевої РНК, очищені звичайним розчином, все ще очевидно змішані з розрізаною РНК та інтронами.
Після розчину для очищення, розробленого Yaohai Bio-Pharma, різні домішки лінійної РНК, такі як розрізана РНК та інтрони, можуть бути успішно видалені.
Перевірка експресії circRNA
Використовуючи звичайну ліпосому, очищену circRNA eGFP трансфікують у клітини 293T, і сигнал флуоресценції спостерігається через 24 години та продовжує посилюватися через 48 годин. Сигнал флуоресценції все ще можна виявити на 7-й день і 14-й день після трансфекції.