Для приготування CircRNA потрібна лінійна РНК як матеріал-попередник (попередник РНК) для циклізації, де попередник РНК зазвичай готується з використанням лінеаризованої плазмідної ДНК як матриці транскрипції та транскрибується in vitro за допомогою РНК-полімерази T7.
Високоякісна плазмідна ДНК необхідна для транскрипції in vitro (IVT). Базуючись на зрілій платформі підготовки плазмід, Yaohai Bio-Pharma може надати послуги високої чистоти та стандартної лінеаризованої плазмідної ДНК (пДНК) для забезпечення цілісності продуктів IVT.
Деталі послуг
| Процес | Додаткова послуга | Сервісні деталі | Період доставки (робочий день) |
| Приготування кільцевої плазміди | Синтез генів | Генний синтез (сторонній) | 7-10 |
| Плазмідна ампліфікація | Плазмідна ампліфікація | 2 |
| Екстракція плазміди |
| Лінеаризований препарат плазміди | Лінеаризація та очищення плазмід | Лінеаризація плазмід | 1 |
| Лінеаризаційне очищення ДНК |
| Контроль якості плазмідної ДНК | Чистота концентрації | Ультрафіолетова (УФ) спектрофотометрія | 1-2 |
| Конформація плазміди | Електрофорез у агарозному гелі (AGE) |
| Капілярний електрофорез (КЕ) - необов'язково |
| Ідентифікація плазміди | Ідентифікація ферменту рестрикції/ AGE |
Наші особливості
Гнучкий вибір методів лінеаризації
- Висока швидкість відновлення
Оптимізація методів вилучення та очищення ДНК для досягнення високих показників відновлення.
Суворі стандарти контролю процесу з коефіцієнтом суперспіральної конформації зразків плазмід для досліджень понад 80%.
Високий стандарт і висока ефективність підготовки плазмід і послуги контролю якості для задоволення експериментальних потреб.
Вивчення проблеми
Візьмемо як приклад продукт Yaohai Bio-Pharma mCherry circRNA, суперспіралізоване співвідношення зразків плазмід матриці транскрипції (дослідницький рівень) становить понад 70%, зі швидкістю лінеаризації, близькою до 100%.
mCherry circRNA готують з лінеаризованою плазмідою як матрицею та трансфікують у клітини 293T. Високий рівень експресії флуоресценції (червона флуоресценція) виявляється через 24 години після трансфекції, який посилюється через 48 годин і все ще може бути виявлений на 7-й день та 14-й день після трансфекції.
Білок mCherry стабільно та ефективно експресується, а чистота транскрипційного шаблону може задовольнити вимоги лікарського засобу circRNA (DP) високої якості.
Перевірка експресії in vitro circRNA mCherry
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕМАЄ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
