У процесі підготовки mRNA in vitro transcription (IVT) лінійна плазмідна ДНК необхідна як транскрипційний шаблон для IVT за допомогою полімерази T7 RNA. Високоякісна плазмідна ДНК є ключовою для транскрипції in vitro.
На основі досвідченої платформи послуг підготовки плазмід, Yaohai Bio-Pharma може пропонувати послугу підготовки лінійної плазмідної ДНК високої чистоти та стандарту для досягнення ефективної транскрипції IVT.
Деталі послуг
| Процес |
Опціональні послуги |
Деталі послуги |
Термін доставки (робочий день) |
| Підготовка циркулярних плазмід |
Синтез генів |
Синтез гену (від третіх осіб) |
7-10 |
| Усилування плазміди |
Усилування плазміди |
2 |
| Екстракція плазміди |
| Підготовка лінійної плазміди |
Лінеаризація та очищення плазмідів |
Лініаризація плазміди |
1 |
| Очищення ДНК після лінійнування |
| Контроль якості ДНК плазміди |
Концентрація чистоти |
Ультрафіолетова (UV) спектрофотометрія |
1-2 |
| Конформація плазміди |
Електрофорез у агарозному гелі (AGE) |
| Капілярна електрофореза (CE) - опціонально |
| Ідентифікація плазмід |
Ідентифікація розщеплювальних ензимів / AGE |
Наші особливості
Гнучкий вибір методів лінеаризації
- Висока відновна здатність
Оптимізація методів витягування та очищення ДНК для досягнення високих показників відновлення.
Строгі стандарти контроля процесу, зі ступінню суперспіральної конформації плазмідних вибірок для досліджень більше 80%.
- Дорослий платформений процес
Високий стандарт та висока ефективність послуг підготовки плазмід та контролю якості для задовolenня експериментальних потреб.
Вивчення випадку
На прикладі продукту mRNA_luciferase каталогу Yaohai Bio-Pharma, вибірка транскрипційного шаблону плазміди (дослідчого рівня) має ступінь суперспіралі більше 90%, лінеаризацію, що наближається до 100%, і наступну ступінь транскрипції до 1:200 (лінеаризована ДНК плазміди:mRNA).
MRNA_luciferase, отримана за допомогою лінеаризованої плазміди як шаблону, трансфікується у клітини 293T, і активність реакції ензим-субстрат оцінюється через 24 години після трансфекції.
Можна виявити очевидний сильний сигнал активності люциферази, тобто протеїн люциферази виражається ефективно, що свідчить про те, що чистота транскрипційного шаблону повністю задовольняє вимогам підготовки високоякісної мРНК.
Аналіз співвідношення суперсплутаних плазмідів
Перевірка виразки mRNA люціферази in vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
