Протеази видалення міток
Щоб покращити розчинність і спростити процес очищення рекомбінантних білків, дослідники зазвичай додають мітки злиття, серед яких зазвичай використовуються His-tag, мальтозозв’язуючий білок (MBP) і глутатіон-S-трансфераза (GST).
Незважаючи на те, що він позначений як додаткова послідовність білка, його слід видалити для підтримки біологічної активності у фармацевтичній промисловості. Для видалення міток злиття потрібні сайт-специфічні протеази, такі як ентерокіназа (EK), тромбін, протеаза вірусу травлення тютюну (TEVp), протеаза 3C риновірусу людини (HRV3C), протеаза малого убіквітин-модифікуючого протеїну (SUMO), вірус плямистості тютюнових жилок ( TVMV) протеази та карбоксипептидази A/B (CPA/CPB).
|
тип
|
Фермент
|
Сайт визнання
|
|
Ендопротеази видалення міток
|
Ентерокіназа (ЕК), Ентеропептидаза
|
DDDDK↓
|
|
Тромбін
|
LVPR↓GS
|
|
Протеаза TEV
|
ENLYFQ↓G
|
|
протеаза HRV3C
|
LEVLFQ↓GP
|
|
SUMO протеаза
|
Третинна структура SUMO
|
|
TVMV протеаза
|
ETVRFQG↓S
|
|
Екзопротеази видалення міток
|
Карбоксипептидаза А (CPA)
|
С-кінцеві амінокислоти, крім Pro, Lys і Arg
|
|
Карбоксипептидаза B (CPB)
|
С-кінцевий Lys і Arg
|
Інші протеази
|
додаток
|
Фермент
|
функція
|
|
Інші протеази
|
Протеаза К
|
Серинова протеаза, яка розщеплює білки шляхом гідролізу пептидних зв’язків.
|
|
IdeS, протеаза IgG
|
Ферменти, що розкладають IgG (Ides), які розщеплюють у специфічному місці імуноглобуліну G (IgG), утворюючи фрагменти Fab та Fc
|
|
IgA1 протеаза
|
Протеолітичний фермент, який розщеплює певну ділянку в послідовності шарнірної ділянки людського імуноглобуліну A1 (IgA1).
|
Нуклеаза
|
додаток
|
Фермент
|
функція
|
|
Нуклеаза
|
Нуклеаза
|
Розщеплює нуклеїнові кислоти (ДНК або РНК) шляхом гідролізу фосфодіефірних зв’язків.
|
|
Обмежити фермент
|
Ендонуклеаза, яка розщеплює ДНК у певних місцях або поблизу них.
|
Амідаза
|
додаток
|
Фермент
|
функція
|
|
Амідаза
|
PNGase F
|
Розщеплює між внутрішніми залишками GlcNAc і аспарагіну олігосахаридів з високим вмістом манози, гібридних і складних.
|
Yaohai Bio-Pharma пропонує універсальне рішення CDMO для ферментативного реагенту
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕМАЄ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
