Minicircle DNA (mcDNA) — це менший негірський вектор ДНК, який похідний від структури батьківської плазмідної ДНК. Minicircle DNA відрізняється від традиційної плазмідної ДНК тим, що вона містить промотор і ген інтересу (GOI), але не має точки реплікації (ORI) та маркера вибору (selMark). Minicircle DNA виробляється у бактеріях шляхом рекомбінації in vivo для вилучення додаткових послідовностей (називаються міні-плазміди) з плазмідної ДНК. Завдяки своєї безпекі, minicircle DNA набула популярності як негірський вектор для генної терапії, ДНК-вакцин тощо.
Рисунок 1. Структура плазмідної ДНК (pDNA) та minicircle ДНК (mcDNA)
Системи рекомбінації Minicircle DNA
Існує чотири основні системи рекомбінації minicircle DNA in vivo, які були вивчені, включаючи інтеграз фагу λ, рекомбіназу Cre фагу P1, резольвазу ParA, інтеграз PhiC31/I-SceI.
|
Стратегія
|
Інтеграз фагу λ
|
Рекомбіназа Cre фагу P1
|
Резольваза ParA
|
Інтеграз PhiC31/I-SceI
|
|
Механізм
|
Тирозинова рекомбіназа, яка функціонує через протеїни FIS і IHF для катализа рекомбінації гіบรідних сайтів att
|
Сайт-специфічна тирозинова рекомбіназа, яка виконує двонапрямкову рекомбінацію при зв'язуванні з сайтами loxP
|
Серинова рекомбіназа, яка виконує незворотню та однобічну рекомбінацію між двома ідентичними сайтами MRS
|
Серинова рекомбіназа, яка медіює однобічну рекомбінацію між сайтами зв'язування attP/attB, тоді як ендонуклеаза I-SceI розщепляє продукт-пов'язані забруднення та нерекомбіновану батьківську плазміду
|
|
Особливості
|
Залежать від вираженості хост-факторів FIS і IHF; власний токсичний вплив; залишкові батьківські плазміди та міні-плазміди
|
Залишкові батьківські плазміди та міні-плазміди
|
Висока видача; залишкові батьківські плазміди та міні-плазміди
|
Розклад батьківської плазміди, пов'язаний зі зменшеною видачею
|
Yaohai Bio-Pharma Пропонує Комплексне Рішення CDMO для Мінікола ДНК
Джерело:
[1] Almeida AM, Queiroz JA, Sousa F, Sousa Â. Minicircle DNA: The Future for DNA-Based Vectors? Trends Biotechnol. 2020 Oct;38(10):1047-1051. doi: 10.1016/j.tibtech.2020.04.008.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
