Все Категории
ENEN
Миникруг ДНК

Миникруг ДНК Россия

Главная >  Модальность  >  Нуклеиновые кислоты  >  Миникруг ДНК

Модальность

Миникруг ДНК

Миникольцевая ДНК (мкДНК) представляет собой меньший по размеру невирусный ДНК-вектор, полученный из родительской плазмидной ДНК-подобной структуры. Миникольцевая ДНК отличается от обычной плазмидной ДНК тем, что она содержит промотор и интересующий ген (GOI), без точки начала репликации (ORI) и маркера селекции (selMark). Миникольцевая ДНК вырабатывается в бактериях посредством рекомбинации in vivo для удаления дополнительных последовательностей (называемых мини-плазмидами) из плазмидной ДНК. Благодаря своей безопасности миникольцевая ДНК приобрела популярность в качестве невирусного вектора для генной терапии, ДНК-вакцин и т. д.

图片

Рисунок 1. Структура плазмидной ДНК (пДНК) и миникольцевой ДНК (мкДНК).

Миникольцевые системы рекомбинации ДНК

Изучены четыре основные системы рекомбинации миникольцевой ДНК in vivo, включая интегразу Phage λ, рекомбиназу Phage P1 Cre, резольвазу ParA, PhiC31 integra se/I-SceI.

Стратегия

Интеграза фага λ

Рекомбиназа Фага P1 Cre

Разрешение ParA

PhiC31 интеграция/I-SceI

Механизм

Тирозинрекомбиназа, которая действует через белки FIS и IHF, катализируя рекомбинацию гибридных сайтов att.

Сайт-специфическая тирозин-рекомбиназа, которая осуществляет двунаправленную рекомбинацию при связывании с сайтами loxP.

Сериновая рекомбиназа, которая осуществляет необратимую и однонаправленную рекомбинацию между двумя идентичными сайтами MRS.

Сериновая рекомбиназа, которая обеспечивает однонаправленную рекомбинацию между сайтами связывания attP/attB, тогда как эндонуклеаза I-SceI расщепляет примеси, связанные с продуктом, и некомбинированную родительскую плазмиду.

Особенности

Зависят от экспрессии факторов хозяина FIS и IHF; внутренняя токсичность; Остаточная родительская плазмида и мини-плазмида

Остаточная родительская плазмида и мини-плазмида

Высокая урожайность; Остаточная родительская плазмида и мини-плазмида

Деградация родительской плазмиды, связанная со снижением выхода
Yaohai Bio-Pharma предлагает универсальное решение CDMO для миникольцевой ДНК
Ссылка:

[1] Алмейда А.М., Кейруш Х.А., Соуза Ф., Соуза А. Миникольцевая ДНК: будущее векторов на основе ДНК? Тенденции Биотехнологии. Октябрь 2020 г.;38(10):1047-1051. doi: 10.1016/j.tibtech.2020.04.008.

Получите бесплатную цитату

Контакты