Циркулярная мРНК (циркулярная РНК) широко используется при изучении функций генов и белков. Между тем он популярен при разработке профилактических и терапевтических биологических препаратов, аналогичных мРНК.
Yaohai Bio-Pharma разработала набор технологий синтеза циркРНК для обеспечения высококачественной РНК, таких как дизайн и оптимизация последовательностей, транскрипция in vitro (IVT), циркуляризация/циклизация, очистка и инкапсуляция липидных наночастиц (LNP). Вся продукция выпускается под строгими стандартами контроля качества (QC).
По сравнению с линейной мРНК, кольцевая РНК (циркулярная РНК) более стабильна по структуре и является основной горячей точкой в текущих исследованиях лекарств на основе нуклеиновых кислот. Он имеет широкий спектр применений в различных областях, будь то кодирование circRNA или некодирование circRNA, включая профилактические вакцины от инфекционных заболеваний, вакцины для терапевтической онкологии, терапевтические онкологические препараты, заместительную белковую терапию, регенеративную медицину, клеточную и генную терапию (CGT). , роль молекулярной губки и аптамер РНК.
Разработка | Дополнительная услуга | Сервис Подробнее | Срок доставки (день) |
Дизайн и оптимизация последовательности циркРНК | Проектирование и оптимизация последовательностей кодирования | Оптимизация кодонов CDS | 1 |
Проектирование и оптимизация некодирующих последовательностей | Последовательность интронов и экзонов, дизайн и оптимизация гомологичных плеч и спейсеров | 1-2 | |
Приготовление кольцевой плазмиды | Генный синтез | Генный синтез (сторонний) | 7-10 |
Плазмидная амплификация | Плазмидная амплификация | 2 | |
Экстракция плазмиды | |||
Приготовление линеаризованной плазмиды | Линеаризация и очистка плазмиды | Линеаризация плазмиды | 1 |
Линеаризация Очистка ДНК | |||
Транскрипция и циклизация in vitro | Транскрипция и циклизация in vitro | Реакции транскрипции и циклизации in vitro | 1-2 |
Переваривание РНКазы R | |||
Оптимизация необязательна | Состав реакции, оптимизация времени | 2-5 | |
Очистка циркРНК | Традиционный метод очистки | Осаждение хлорида лития | 1 |
Магнитная очистка шариков | 1 | ||
Очистка высокочистой циркРНК | Препаративная высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) | 1-2 | |
Обмен буфера | ультрафильтрация | 1 | |
Лиофилизация циркРНК | Образец заполнения | Заполнение | 2-3 |
лиофилизация | Предварительная заморозка | ||
Первичная сушка (сублимация) | |||
Вторичная сушка (десорбция) | |||
Инкапсуляция циркРНК-LNP | ЛНП-инкапсуляция | Предварительная обработка материалов и жидкостей | 2 |
Смешивание микрофлюидных устройств | |||
Обмен буфера | Тангенциальная поточная фильтрация | 1 | |
стерилизовать | Фильтрация | ||
Контроль качества плазмидной ДНК | Концентрация/чистота | Ультрафиолетовая (УФ) спектрофотометрия | 1-2 |
Конформация плазмиды | Электрофорез в агарозном геле (AGE) | ||
Капиллярный электрофорез (КЭ) – опционально | |||
Идентификация плазмиды | Идентификация рестрикционных ферментов/ВОЗРАСТ | ||
Контроль качества циркРНК | Концентрация/чистота | Ультрафиолетовая (УФ) спектрофотометрия | - |
чистота | Электрофорез в агарозном геле (AGE)/E-гель | 0.5 | |
ВЭЖХ-дополнительно | 1 | ||
Контроль качества циркРНК-ЛНП | Эффективность инкапсуляции | Рибо-Зеленый метод | 1 |
Размер частицы | Динамическое рассеяние света (DLS) | 1 | |
Индекс полидисперсности | Динамическое рассеяние света (DLS) | 1 | |
Зета-потенциал | Динамическое рассеяние света (DLS) | 1 | |
Клеточный анализ эффективности | Трансфекция клеток | Покрытие клеток, трансфекция клеток | 4 |
Обнаружение целевого белка | Флуоресцентное наблюдение, Вестерн-блот/ИФА | 1-3 |
Мы трансфицировали циркРНК усиленного зеленого флуоресцентного белка (циклРНК eGFP), циркРНК mCherry, циркРНК люциферазы в клетки 293T и обнаружили целевой белок с помощью флуоресценции, люминесцентного или цветового сигнала, вестерн-блоттинга (WB), иммуноферментного анализа (ELISA).
Клеточные анализы активности образцов циркРНК от Yaohai Bio-Pharma