В процессе подготовки мРНК для транскрипции in vitro (IVT) требуется линеаризованная плазмидная ДНК в качестве матрицы транскрипции для IVT с помощью РНК-полимеразы Т7. Высококачественная плазмидная ДНК имеет решающее значение для транскрипции in vitro.
Основываясь на платформе услуг по подготовке зрелых плазмид, Yaohai Bio-Pharma может предложить услуги по приготовлению линеаризованной плазмидной ДНК высокой чистоты и высоких стандартов для достижения эффективной транскрипции IVT.
Подробности об услугах
| Разработка | Дополнительная услуга | Сервис Подробнее | Срок доставки (рабочий день) |
| Приготовление кольцевой плазмиды | Синтез генов | Синтез генов (сторонний) | 7-10 |
| Плазмидная амплификация | Плазмидная амплификация | 2 |
| Экстракция плазмиды |
| Препарат линеаризованной плазмиды | Линеаризация и очистка плазмиды | Линеаризация плазмиды | 1 |
| Линеаризация очистки ДНК |
| Контроль качества плазмидной ДНК | Концентрация чистоты | Ультрафиолетовая (УФ) спектрофотометрия | 1-2 |
| Конформация плазмиды | Электрофорез в агарозном геле (AGE) |
| Капиллярный электрофорез (КЭ) – опционально |
| Идентификация плазмиды | Идентификация рестрикционных ферментов/ ВОЗРАСТ |
Наши функции
Гибкий выбор методов линеаризации
- Высокая скорость восстановления
Оптимизация методов экстракции и очистки ДНК для достижения высоких показателей восстановления.
- Строгий контроль качества
Строгие стандарты контроля процесса, степень суперспиральной конформации образцов плазмид для исследований превышает 80%.
Высокие стандарты и высокоэффективные услуги по приготовлению и контролю качества плазмид для удовлетворения экспериментальных потребностей.
Пример
На примере продукта мРНК_люциферазы каталога Yaohai Bio-Pharma образец плазмиды транскрипционной матрицы (исследовательского уровня) имеет соотношение суперспиралей более 90%, коэффициент линеаризации, близкий к 100%, и последующий коэффициент транскрипции до 1:200 ( линеаризованная плазмидная ДНК:мРНК).
МРНК_люциферазу, полученную путем приготовления линеаризованной плазмиды в качестве матрицы, трансфицируют в клетки 293Т и оценивают активность фермент-субстратной реакции через 24 ч после трансфекции.
Можно обнаружить очевидный сильный сигнал активности люциферазы, т.е. белок люциферазы экспрессируется эффективно, что позволяет предположить, что чистота матрицы транскрипции может полностью удовлетворить требования получения высококачественной мРНК.
Анализ соотношения сверхспиральных плазмид
Проверка экспрессии мРНК люциферазы in vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕТ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
