В процессе приготовления in vitro транскрипции (IVT) mRNA требуется линеаризованная плазмидная ДНК как транскрипционный шаблон для IVT с помощью полимеразы T7 РНК. Качественная плазмидная ДНК критически важна для in vitro транскрипции.
На основе зрелой платформы по подготовке плазмид Yaohai Bio-Pharma может предложить услугу по приготовлению линеаризованной плазмидной ДНК высокой чистоты и высокого стандарта для эффективной транскрипции IVT.
Детали услуг
| Процесс |
Необязательные услуги |
Детали услуги |
Срок доставки (рабочий день) |
| Подготовка циркулярной плазмиды |
Синтез генов |
Синтез генов (Третья сторона) |
7-10 |
| Усилитель плазмида |
Усилитель плазмида |
2 |
| Извлечение плазмида |
| Подготовка линейного плазмида |
Линеаризация и очистка плазмид |
Линеаризация плазмида |
1 |
| Очистка ДНК после линеаризации |
| Контроль качества плазмидной ДНК |
Концентрация и чистота |
Ультрафиолетовая (UV) спектрофотометрия |
1-2 |
| Конформация плазмида |
Агарозный Гель Электрофорез (AGE) |
| Капиллярный электрофорез (CE) - опционально |
| Идентификация плазмида |
Определение рестрикционных энзимов / AGE |
Наши особенности
- Шаблонная плазмида Freecut
Гибкий выбор методов линеаризации
- Высокая скорость восстановления
Оптимизация методов извлечения и очистки ДНК для достижения высокой скорости восстановления.
- Строгий контроль качества
Строгие стандарты контроля процесса, с коэффициентом суперспиралевого состояния исследовательских образцов плазмид более 80%.
- Зрелый платформенный процесс
Услуги по подготовке и контролю качества плазмид на высоком уровне и с высокой эффективностью для удовлетворения экспериментальных потребностей.
Изучение кейса
На примере продукта Yaohai Bio-Pharma каталог mRNA_luciferase, шаблонная транскрипционная плазмида (исследовательский уровень) имеет коэффициент суперспирали более 90%, коэффициент линеаризации близкий к 100%, а последующий коэффициент транскрипции достигает 1:200 (линеаризованная ДНК плазмиды:mRNA).
MRNA_luciferase, полученная с помощью подготовки линеаризованного плазмида в качестве шаблона, трансфектируется в клетки 293T, и активность фермент-субстратной реакции оценивается через 24 часа после трансфекции.
Можно обнаружить явный сильный сигнал активности люциферазы, то есть белок люциферазы эффективно экспрессируется, что указывает на то, что чистота транскрипционного шаблона полностью удовлетворяет требованиям по подготовке высококачественной mRNA.
Анализ соотношения суперспиралевидных плазмид
Подтверждение выражения mRNA люциферазы in vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
