Для приготовления CircRNA требуется линейная РНК в качестве материала-предшественника (предшественника РНК) для циклизации, при этом предшественник РНК обычно готовится с использованием линеаризованной плазмидной ДНК в качестве матрицы транскрипции и транскрибируется in vitro с помощью РНК-полимеразы T7.
Плазмидная ДНК высокого качества необходима для транскрипции in vitro (IVT). Основываясь на платформе услуг по подготовке зрелых плазмид, Yaohai Bio-Pharma может предоставить услуги по приготовлению стандартной линеаризованной плазмидной ДНК (пДНК) высокой чистоты для обеспечения целостности продуктов IVT.
Подробности об услугах
| Разработка | Дополнительная услуга | Сервис Подробнее | Срок доставки (рабочий день) |
| Приготовление кольцевой плазмиды | Синтез генов | Синтез генов (сторонний) | 7-10 |
| Плазмидная амплификация | Плазмидная амплификация | 2 |
| Экстракция плазмиды |
| Препарат линеаризованной плазмиды | Линеаризация и очистка плазмиды | Линеаризация плазмиды | 1 |
| Линеаризация очистки ДНК |
| Контроль качества плазмидной ДНК | Концентрация чистоты | Ультрафиолетовая (УФ) спектрофотометрия | 1-2 |
| Конформация плазмиды | Электрофорез в агарозном геле (AGE) |
| Капиллярный электрофорез (КЭ) – опционально |
| Идентификация плазмиды | Идентификация рестрикционных ферментов/ ВОЗРАСТ |
Наши функции
Гибкий выбор методов линеаризации
- Высокая скорость восстановления
Оптимизация методов экстракции и очистки ДНК для достижения высоких показателей восстановления.
- Строгий контроль качества
Строгие стандарты контроля процесса, степень суперспиральной конформации образцов плазмид для исследований превышает 80%.
Высокие стандарты и высокоэффективные услуги по приготовлению и контролю качества плазмид для удовлетворения экспериментальных потребностей.
Пример
Если взять в качестве примера mCherry circRNA продукта Yaohai Bio-Pharma, то соотношение суперспиралей в образцах транскрипционных матричных плазмид (исследовательского уровня) составляет более 70%, а степень линеаризации близка к 100%.
mCherry circRNA получают с использованием линеаризованной плазмиды в качестве матрицы и трансфицируют в клетки 293T. Высокий уровень экспрессии флуоресценции (красная флуоресценция) обнаруживается через 24 часа трансфекции, который усиливается через 48 часов и все еще может быть обнаружен на 7-й и 14-й день после трансфекции.
Белок mCherry стабильно и эффективно экспрессируется, а чистота транскрипционной матрицы может соответствовать требованиям к лекарственному продукту циркРНК (DP) высокого качества.
Проверка экспрессии in vitro циркРНК mCherry
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕТ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
