Значимость проверки штаммов
Отбор подходящих хозяев необходим для разработки CMC биопрепаратов, что определяет качество и последовательность продукта и производственного процесса. Прямой целью отбора хозяев является предоставление кандидатского первичного клеточного банка (PCB) с высоким уровнем выражения и высокой стабильностью как в отношении стабильности передачи, так и стабильности хранения. Отбор подходящего хозяина необходим по двум основным причинам:
- Во-первых, выбрать микробного хозяина с высоким уровнем выражения. Существует множество коммерчески доступных штаммов, которые используются для выражения различных типов белков, таких как токсичные белки, растворимые белки или эукариотические белки.
- Во-вторых, отобрать хозяина с генетической стабильностью. Тестирование генетической стабильности является ключевой точкой на протяжении всего жизненного цикла производства. Рекомендуется считать высокую генетическую стабильность еще одной ключевой характеристикой подходящего штамма.
Ключевые слова: отбор штаммов микроорганизмов, скрининг микробных штаммов, высокопроизводительный скрининг бактерий или дрожжей, отбор высокопроизводящих штаммов, отбор высокоустойчивых штаммов, генетически устойчивый отбор штаммов. Применение: медицина для человека, ветеринарная медицина, вакцины, синтетическая биология, рекомбинантные крупные молекулы биологических препаратов, биологические реагенты.
Услуги по отбору штаммов от Yaohai Bio-Pharma
Благодаря более чем 10-летнему опыту работы в области CDMO микробиологических биопрепаратов, мы поддерживаем разработку и производство различных крупных молекул, включая рекомбинантные субъединичные вакцины, вирусоподобные частицы (VLP), гормоны (инсулин, GLP-1, гормон роста), цитокины (Интерлейкин-2/IL-2, IL-15, IL-21), факторы роста (ЭГФ, ФГФ, НГФ), нанотела/однодоменные антитела (sdAbs), ферменты и т.д.
Мы накопили богатый опыт в отборе различных типов плазмидных векторов и микробных хозяев, включая бактерии Escherichia coli (E. coli), и дрожжами Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorfa (H. polymorfa). Мы можем найти лучшую систему экспрессии для ваших уникальных биопрепаратов.
Мы собрали различные микробные штаммы с четкими источниками и стандартным свидетельством о соответствии (CoA), включая Коли-бактерии экспрессию на базе бактерий и дрожжей.
Детали услуги
|
Услуги
|
Детали услуги
|
Минимальные сроки выполнения/дни
|
Результаты работы
|
|
Конструирование штамма (E. coli)
|
Трансформация плазмид (множество хозяев)
|
5
|
Свидетельство о соответствии коммерческих штаммов Отчет о конструировании штамма
|
|
ПЦР верификация
|
|
Очистка штамма
|
|
Консервация штамма
|
|
Конструирование штамма (дрожжи)
|
Подготовка компетентных клеток дрожжей
|
10
|
|
Линеаризация плазмида
|
|
Электротрансформация
|
|
Скрининг устойчивости/питательного дефицита
|
|
Очистка штамма
|
|
Консервация штамма
|
|
Отбор подходящего хоста
|
Извлечение ДНК плазмида или генома
|
15-20
|
Процесс отбора хозяина СОА инженерных штаммов
|
|
ПЦР-верификация, рестрикционное расщепление
|
|
Секвенирование Целевого Гена
|
|
Отбор хозяев с высоким уровнем выражения
|
|
Отбор хозяев с генетической стабильностью
|
|
Консервация штамма
|
Изучение кейса
Подходящий хозяин увеличивает уровень экспрессии белка в 2,5 раза.
Нам поручили разработать высокопроизводительный E. coli штамм. И мы испытали три типа коммерческих E. coli хозяев, исходя из характеристик целевого белка. Было показано, что штаммы S1-1 и S1-2 (Рис А: дорожки 1,2) увеличили уровень белка в 3,5 раза по сравнению с начальным штаммом заказчика (Рис А: дорожка 3).
Кроме того, штамм S1-1 продемонстрировал высокую генетическую стабильность (Рис B), и он был выбран как кандидатский штамм для создания первичной клеточной библиотеки (PCB).
Особенности нашего сервиса
Подтвержденная экспертиза в работе с различными микробными хозяевами, например, E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink strain1/2/3/4; S. cerevisiae и H. polymorpha .
У нас есть опыт работы с E. coli периплазматическим секрецированием, растворимым и выражением в inclusion body, а также внутриклеточным или секреционным выражением в дрожжах. Мы не добавляем антибиотики или добавляем их в соответствии с регулирующими указаниями.
Мы создаем платформу высокопроизводительного скрининга для отбора высокопроизводящих и стабильных штаммов из более чем сотни кандидатских штаммов.
Обеспечивается трассируемость процесса инженерного анализа напряжений и отбора проб в соответствии с требованиями по управлению данными и записями.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
