Дисульфидные связи иногда называют S-S связями или мостиками дисульфида. Дисульфидные мостики влияют на биологическую активность биопрепаратов, таких как пептиды, белки и антитела.
Yaohai Bio-Pharma предлагает услуги анализа дисульфидных связей, основанные в основном на жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (LC-MS).
Мы принимали участие в характеристиках структуры белков различных крупных молекул, включая рекомбинантные субъединичные вакцины, нанотеллы/VHHs/однодоменные антитела (sdAbs), фрагменты антител, гормоны/пептиды, цитокины, факторы роста (GF), ферменты, коллагены и т.д.
Регуляторные требования к дисульфидным связям
В разных биопрепаратах существует разное количество и формирование дисульфидных мостиков, которые должны быть полностью оценены во время исследований характеристики белка, если ожидаемая первичная аминокислотная последовательность продукта содержит аминокислоту цистеин. Это также требуется регуляторным документом ICH Topic Q6B.
Аналитические методы
| Анализ |
Методы |
| Дисульфидные связи |
Жидкостная хроматография-масс-спектрометрия (LC-MS) после дигестии |
Для получения необходимых данных для полной оценки дисульфидных мостиков и свободных тиолов ученые из Yaohai Bio-pharma проводят пептидное картографирование после дигестии с использованием специфической протеазы. Затем анализируют с помощью онлайн LC/ Электросpray Ионизация Масс-Спектрометрии (ES-MS) и/или LC/ES-MS/MS до и после редукции.
Yaohai Bio-pharma также может проводить тест Эллмана, который является важной частью любой полной оценки продуктов, содержащих цистеин. В рамках теста Эллмана мы производим дериватизацию сульфгидрильных групп с использованием (5,5’-дитио-бис-[2-нитробензойной кислоты]). Для определения уровней свободных тиолов полученный продукт анализируют методом УФ-спектрофотометрии при 412 нм.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
