Анализ сайта N-гликозилирования имеет решающее значение для понимания функций гликанов. Yaohai Bio-Pharma использует жидкостную хроматографию-масс-спектрометрию (ЖХ-МС) после ферментативного расщепления сайта N-гликозилирования.
Мы принимали участие в структурной характеристике белков различных крупных молекул, включая рекомбинантные субъединичные вакцины, нанотела/VHH/однодоменные антитела (sdAbs), фрагменты антител, гормоны/пептиды, цитокины, факторы роста (GF), ферменты, коллагены, и т. д.
Нормативные требования к сайту N-гликозилирования
Согласно рекомендациям ICH Q6B, «для гликопротеинов определяют содержание углеводов (нейтральных сахаров, аминосахаров и сиаловых кислот). Кроме того, в максимально возможной степени анализируются структура углеводных цепей, структура олигосахаридов (антенный профиль) и сайт(ы) гликозилирования полипептидной цепи.
Аналитический метод
Анализ |
методы |
Сайт N-гликозилирования |
Жидкостная хроматография-масс-спектрометрия (ЖХ-МС) после ферментативного расщепления |
Процедуры
1. Ферментативное расщепление белка с использованием трипсина или другой протеазы.
2. Отдельные фрагменты гликопептидов.
3. Подтвердите сайт N-гликозилирования с помощью LC-MS.
4. Анализ данных