Биологические лекарственные вещества являются сложными большими молекулами, которые особенно чувствительны к факторам окружающей среды: температуре, окислению, свету, ионному содержанию и сдвиговым нагрузкам. Критически важно проводить исследования стабильности как самого лекарственного вещества, так и готового препарата при запланированных условиях хранения, ускоренных условиях и принудительном распаде. Данные о стабильности обычно используются для подтверждения срока годности, даты истечения срока и условий хранения.
Согласно руководству ICH Q5C, Yaohai Bio-Pharma предоставляет услуги по исследованию стабильности для белков, пептидов, плазмид и мРНК, включая долгосрочные исследования стабильности, ускоренные исследования стабильности и исследования принудительного распада. Кроме того, у нас есть все необходимые возможности для хранения образцов и анализа Критических Характеристик Качества (CQA) для сбора данных о стабильности.
Регуляторные требования к исследованиям стабильности
Согласно руководству ICH Q5C, «Необходимо разработать соответствующие данные о стабильности для биотехнологического/биологического продукта, так как многие внешние условия могут повлиять на его активность, чистоту и качество. Также настоятельно рекомендуется проводить исследования субстанции и готового лекарственного препарата при ускоренных и стрессовых условиях».
Исследования стабильности в реальном времени (долгосрочные)
При исследовании стабильности в реальном времени (долгосрочных испытаниях) субстанция или готовый лекарственный препарат хранятся в запланированных условиях хранения и контролируются до тех пор, пока биологические характеристики не изменятся за пределами допустимых норм. В результате долгосрочных исследований стабильности можно установить срок годности, дату истечения срока годности, условия хранения и интервалы отбора проб/испытаний.
Таблица 1. Частота испытаний в долгосрочных исследованиях стабильности биопрепаратов до регистрации
| Срок годности |
Интервалы испытаний |
Временные точки |
| 1 год или менее |
Ежемесячно в течение первых 3 месяцев;
Каждые 3 месяца затем
|
На 0, 1, 2, 3, 6, 9 и 12 месяцев |
| Более 1 года |
Каждые 3 месяца в течение первого года;
Каждые 6 месяцев во второй год;
Ежегодно затем
|
На 0, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 36 месяцах и ежегодно затем |
Ускоренные исследования стабильности
Рекомендуемая температура хранения инъекционных биофармацевтических препаратов обычно находится в диапазоне от 2 до 8℃. Ускоренные исследования стабильности проводятся в течение более короткого периода времени при ускоренных условиях, таких как высокая температура. Данные о стабильности признаются вспомогательной информацией для оценки стабильности продукта и широко используются для определения срока годности и даты истечения срока годности, а также для разработки формуляции.
Таблица 2. Примеры ускоренных исследований стабильности
| Исследования стабильности |
Ускоренные условия |
Точки отбора проб |
| Ускоренные исследования стабильности |
повышенная температура
относительная влажность
|
В 0, 1, 2, 3, 6 месяцев |
Исследования принудительной деградации
Целью исследований принудительной деградации является сбор информации о стабильности в условиях стресса, таких как высокие температуры, влажность, свет, окисление, замораживание-оттаивание или механический стресс (тряска, срез). Исследования принудительной деградации лекарственного вещества или лекарственного препарата в экстремальных условиях могут помочь выявить ключевые факторы/параметры, приводящие к деградации биологических препаратов. Эти данные полезны для оценки устойчивости формулы и процесса производства.
Таблица 3. Примеры исследований принудительной деградации
| Напряжение |
Условия стресса |
Время действия |
| Температура |
Высокая температура (например, 25℃, 30℃, 37℃, 40℃) |
Дни-месяцы |
| Влажность |
Относительная влажность (0~100%) |
Дни-месяцы |
| Светлый |
Минимум 1,2 миллиона лк·ч и 200 Вт·ч/м² |
Несколько дней |
| Циклы замораживания-оттаивания |
замораживание–оттаивание (от -20℃, -80℃ до 15℃) |
1~5 циклов |
| Просеивание, перемешивание |
50~500 об/мин |
Часы-дни |
Аналитические методы для поддержки исследований стабильности
| Критические показатели качества (CQAs) |
Аналитические методы |
| Общее содержание белка |
УФ, BCA, Bradford, Lowry |
| Видимые частицы |
Визуальная проверка |
| Агрегация, фрагменты |
Динамическое светорассеяние Размерно-исключающая хроматография (SEC) ХПЛЦ/УПЛЦ, Капиллярный электрофорез ЦЭ (КГЭ, КЗЭ, сИЭФ/иИЭФ), Нередуцируемый SDS-ПАГЭ |
| Картирование и секвенирование пептидов |
ЖК-МС/МС |
| Дисульфидные связи |
ЖК-МС/МС |
| ПТМ (окисление, изомеризация, дезамидация, гликозилирование) |
ЖК-МС/МС |
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
