Пластидная ДНК, как в vitro шаблон для транскрипции in vitro (IVT), является важным сырьем для производства mRNA. Высокая производительность, высокая чистота и высокая эффективность восстановления пластидной ДНК являются основными цель во время разработки процесса пластида.
Yaohai Bio-Pharma предоставляет комплексное решение для разработки пластидов, включая процессы верхнего потока (ферментацию), нижнего потока (очистку), характеристики процесса и его валидацию. У нас есть обширный опыт повышения выхода пластидов и их изоляции из сложных матриц за счет разработки и оптимизации процессов ферментации, очистки и удаления примесей.
Основной биопроцесс для производства пластидов включает: Escherichia coli (E. coli) ферментацию, сбор клеток и щелочную лизву, очистку, концентрацию, трехступенчатый хроматографический процесс (захват, промежуточная очистка и доводка) и концентрацию.
Детали услуги | Операционные единицы | Параметры |
E. coli ферментация |
Колба для встряхивания | Состав среды, антибиотик, объем инокуля, температура роста и т.д. |
Ферментор (7 Л) |
Антибиотик, объем инокуля, температура роста, pH, растворенный кислород (DO), режим подачи (например, непрерывный), питательная среда, время ферментации и т.д. |
|
Сбор клеток | Микрофильтрация | Стандарт E. coli процесс сбора |
Лизис клеток | Расщепление клеток, щелочной лизис, нейтрализация | Отношение щелочности, время лизиса |
Прояснение | Фильтрация | Первичная фильтрация, 20 µм и фильтрационная система 5 µm (предпочтительная) |
Концентрация | Ультрафильтрация, тангенциальная потоковая фильтрация | Размер пор (или NMWC), Трансмембранное давление (TMP), Флюкс, соотношение объема фильтрата к площади мембраны |
Трехступенчатая хроматография | Хроматография размерного исключения (SEC) или гель-фильтрационная хроматография (GFC) | Длина и диаметр колонки, состав буфера, объем вводимой пробы, состав подвижной фазы (сорбция и десорбция), pH, скорость потока, условия равновесия, связывания, промывки и элюции. |
Афинная хроматография (AF) | ||
Хроматография на ананионном обменнике (AEX) | ||
Концентрация | Ультрафильтрация, тангенциальная потоковая фильтрация | Размер пор (или NMWC), Трансмембранное давление (TMP), Флюкс, соотношение объема фильтрата к площади мембраны |
Более широкие решения для процессов очистки биологических препаратов |