Все категории
Подготовка белков без тэгов

Микробное CDMO

Подготовка белков без тэгов

Белковые теги, используемые как фьюзинг-партнеры в рекомбинантных ДНК-технологиях, позволяют эффективно проводить одноступенчатую аффинную очистку различных белков/пептидов с разными характеристиками. Несмотря на это важное преимущество, теги как экзогенные аминокислоты могут изменять структуру белка и его биологические функции. Поэтому белки или пептиды без тегов более предпочтительны для обеспечения безопасности и эффективности, особенно в области биофармацевтики. Рекомбинантный белок с фьюзинг-тегом имеет ограниченные возможности для получения разрешения от медицинских/фармацевтических регулирующих органов.

На основе платформы исследований и разработок микробиологических биопрепаратов Yaohai Bio-Pharma предлагает индивидуальные услуги по подготовке белков без тегов, направленные на достижение уникальных целей в исследованиях, разработках и производстве для клинического использования.

Ключевые слова: производство белков без тегов, очистка непомеченных белков, подготовка белков на основе свободных тегов, экспрессия и очистка белков без тегов, высокоочищенный целевой белок без тегов

Применение: исследование человеческой медицины, разработка ветеринарной медицины, разработка рекомбинантных вакцин, производство рекомбинантных биологических молекул большого размера

Наша микробиологическая платформа НИОКР

У нас есть опыт в инженерии микробных штаммов, ферментации и очистке продукции.

Бактерии: Escherichia coli (E. coli)

Дрожжи: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Настройка параметров
Модальность Рекомбинантный белок
Исходные материалы Последовательности генов, рекомбинантный плазмид или инженерные штаммы
Результаты работы Очистка: >80%, >85%, >90% Количество: 0.2~10 г (будет определено проектом)
Система выражения и формирование

E. coli секреция в перiplазматическом пространстве, растворимое и выражение в inclusion body;

Выражение внутри клеток дрожжей или секреция

Методы анализа Ультрафиолетовый (UV), ассай бикарбоновой кислоты (BCA), Bradford, или Lowry для количественного определения
Электрофорез в полиакриламидном геле в присутствии SDS (SDS-PAGE) для тестирования очистки
Необязательно: западный блот (WB), иммуноферментный анализ (ELISA), высокоэффективная жидкостная хроматография (HPLC)
Остаточные примеси Эндотоксин (по желанию)
Детали услуги

Услуги

Детали услуги

Минимальный срок выполнения (рабочий день)

Синтез генов

Оптимизация кодонов для конкретного экспрессионного хозяина

7 ~ 10 дней

Синтез генов

Конструирование плазмида/вектор

Клонирование в плазмиду/вектор

2 дня

Трансформация плазмида

Проверка полимеразной цепной реакцией (ПЦР), дигестия ограничительными энзимами, секвенирование гена

3 дня

Выражение белка в E. coli

Трансформация плазмида,

2 дня

Культивирование в колбе

3 дня

ферментация объемом 7 л, оптимизация

4 дня / партия

Очищение белка без тэга, оптимизация

5~10 дней / партия

Тестирование методом электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE)

Выражение белка в дрожжах

Подготовка компетентных клеток дрожжей

4 дня

Линеаризация плазмиды и электро Преобразование

ферментация объемом 7 л, оптимизация

5 дней

Очищение белка без тэга, оптимизация

7 дней / партия

Очищение белка без тэгов

5~10 дней / партия

Контроль качества методом SDS-ПАГЭ

Дополнительные услуги (по желанию)
Получить бесплатную консультацию

Get in touch