Определение молекулярной массы методом LC-MS
Целостная молекулярная масса всегда считалась важной характеристикой биопрепаратов. Анализ целостной молекулярной массы используется для демонстрации продуктов белков/пептидов и подтверждения биопрепаратов. Измерение молекулярной массы является требованием регулирующих органов.
Yaohai Bio-Pharma предлагает анализ целостной молекулярной массы в нативных, восстановленных и N-де-N-гликозилированных условиях. Мы используем жидкостную хроматографию-масс-спектрометрию (LC-MS) для определения целостной молекулярной массы.
Регуляторные требования к молекулярной массе
В ICH Q6 рекомендуется, что «молекулярная масса (или размер) определяется с использованием хроматографии на геле, электрофореза в полиакриламидном геле с SDS (в восстанавливающих и не восстанавливающих условиях), масс-спектрометрии (МС) и других подходящих методик».
Аналитические методы
| Анализ |
Методы |
| Молекулярная масса |
Масс-спектрометрия жидкостной хроматографии (LC/ES-MS) нативных, восстановленных, N-дегликозилированных белков или субъединиц |
Аналитические процедуры
Целевая молекулярная масса:
- Проведение LC-MS на нативном образце в полученном виде.
- Анализ данных LC-MS.
Восстановленная молекулярная масса:
- Обработка белкового образца подходящим восстанавливающим агентом;
- Проведение LC-MS на восстановленном белке;
- Анализ данных LC-MS.
N-дегликозилированная молекулярная масса:
- Удаление N-гликанов с помощью подходящего фермента;
- Проведение LC-MS на N-дегликозилированном белке;
- Анализ данных LC-MS.
Уменьшенная и N-дегликозилированная молекулярная масса:
- Обработка белкового образца подходящим восстанавливающим агентом;
- Удаление N-гликанов с помощью подходящего фермента;
- Проведение LC-MS на уменьшенном и N-дегликозилированном белке;
- Анализ данных LC-MS.
Молекулярная масса белкового субъединица:
- Расщепление субъединиц
- Проведение LC-MS на белковой субъединице
- Анализ данных LC-MS
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
