Все Категории
ENEN
Массовый анализ белков с использованием LC-MS

Массовый анализ белков с использованием LC-MS

Главная >  Микробный CDMO  >  Анализ и тестирование  >  Характеристика структуры белка  >  Массовый анализ белков с использованием LC-MS

Микробный CDMO

Анализ молекулярной массы белка

Определение молекулярной массы методом ЖХ-МС

Неповрежденная молекулярная масса всегда считалась важной характеристикой биологических препаратов. Анализ интактной молекулярной массы используется для демонстрации белковых/пептидных продуктов и проверки биологических препаратов. Измерение молекулярной массы является требованием нормативных документов.

Yaohai Bio-Pharma предлагает анализ неповрежденной молекулярной массы в нативных, восстановленных, N-дегликозилированных условиях. Мы используем жидкостную хроматографию-масс-спектрометрию (ЖХ-МС) для определения неповрежденной молекулярной массы.

Нормативные требования к молекулярной массе

В ICH Q6 рекомендуется «определять молекулярную массу (или размер) с использованием эксклюзионной хроматографии, электрофореза в ДСН-полиакриламидном геле (в восстанавливающих и невосстанавливающих условиях), масс-спектрометрии (МС) и других соответствующих методов».

Аналитические методы
Анализ методы
Молекулярная масса ЖХ-МС/жидкостная хроматография/масс-спектрометрия с электрораспылением (ЖХ/ЭС-МС) нативных, восстановленных, N-дегликозилированных белков или субъединиц
Аналитические процедуры

Неповрежденная молекулярная масса:

  • Выполнение ЖХ-МС на полученном нативном образце.
  • Анализ данных ЖХ-МС.

Пониженная молекулярная масса:

  • Обработка образца белка подходящим восстановителем;
  • Выполнение ЖХ-МС восстановленного белка;
  • Анализ данных ЖХ-МС.

N-дегликозилированная молекулярная масса:

  • Удаление N-гликанов подходящим ферментом;
  • Выполнение ЖХ-МС на N-дегликозилированном белке;
  • Анализ данных ЖХ-МС.

Пониженная и N-дегликозилированная молекулярная масса:

  • Обработка образца белка подходящим восстановителем;
  • Удаление N-гликанов подходящим ферментом;
  • Выполнение ЖХ-МС на восстановленном и N-дегликозилированном белке;
  • Анализ данных ЖХ-МС.

Молекулярная масса белковой субъединицы:

  • Расщепление субъединицы
  • Выполнение ЖХ-МС на белковой субъединице
  • Анализ данных ЖХ-МС
Получите бесплатную цитату

Свяжитесь с нами