Содержание свободного сульфгидрила является одним из важных свойств белков, включая моноклональные антитела (mAb). Обнаружение свободных сульфгидрилов в белках может свидетельствовать о неполном образовании дисульфидной связи, отражать остатки цистеина, доступные для конъюгации, и давать представление о стабильности и структуре белка. Это имеет решающее значение для ранней разработки процесса, а также для надзора за производством на поздней стадии.
Yaohai Bio-Pharma предлагает услуги по свободным сульфгидрильным группам на основе анализа Эллмана, который дериватизирует сульфгидрилы с использованием (5,5'-дитио-бис-[2-нитробензойной кислоты]).
Мы принимали участие в структурной характеристике белков различных крупных молекул, включая рекомбинантные субъединичные вакцины, нанотела/VHH/однодоменные антитела (sdAbs), фрагменты антител, гормоны/пептиды, цитокины, факторы роста (GF), ферменты, коллагены, и т. д.
Нормативные требования к свободным сульфгидрильным группам
ICH Q6B. Если на основании последовательности гена желаемого продукта ожидаются остатки цистеина, следует определить количество и положения любых свободных сульфгидрильных групп и/или дисульфидных мостиков, насколько это возможно. Для этой оценки могут быть полезны пептидное картирование (в восстанавливающих и невосстанавливающих условиях), масс-спектрометрия или другие подходящие методы.
Аналитические методы
Анализ |
методы |
Свободные сульфгидрильные группы |
анализ Эллмана |