Значение штаммового скрининга
Скрининг подходящих хозяев необходим для разработки биологических препаратов CMC, что определяет качество и постоянство продукта и производственного процесса. Непосредственной целью скрининга хозяев является создание банка первичных клеток-кандидатов (PCB) с высокими уровнями экспрессии и высокой стабильностью как с точки зрения стабильности пассажа, так и стабильности при хранении. Поиск подходящего хозяина необходим по двум основным причинам:
- Во-первых, выбрать микробного хозяина с высоким уровнем экспрессии. Существует множество коммерчески доступных штаммов, которые используются для экспрессии различных типов белков, таких как токсичные белки, растворимые белки или эукариотические белки.
- Во-вторых, проверить хозяина на генетическую стабильность. Тестирование генетической стабильности является ключевым моментом на протяжении всего жизненного цикла производства. Предполагается, что высокая генетическая стабильность является еще одной ключевой характеристикой подходящего штамма.
Ключевые слова: селекция штаммов микробов, скрининг штаммов микробов, высокопроизводительный скрининг бактерий или дрожжей, скрининг высокопродуцирующих штаммов, скрининг высокостабильных штаммов, скрининг генетически стабильных штаммов. Применение: медицина человека, медицина для животных, вакцина, синтетическая биология, рекомбинантные большие молекулы. биологические препараты, биологический реагент
Услуги по скринингу штаммов Yaohai Bio-Pharma
Опираясь на более чем 10-летний опыт CDMO в области микробных биологических препаратов, мы поддерживаем разработку и производство различных крупных молекул, включая рекомбинантные субъединичные вакцины, вирусоподобные частицы (VLP), гормоны (инсулин, GLP-1, гормон роста), цитокины ( Интерлейкин-2/IL-2, IL-15, IL-21), факторы роста (EGF, FGF, NGF), нанотела/однодоменные антитела (sdAb), ферменты и т. д.
Нами накоплен богатый опыт подбора различных типов плазмидных векторов и микробных хозяев, в том числе бактерий. кишечная палочка (кишечная палочка), и дрожжи Pichia Pastoris (P. Pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula Polymorpha (H. Polymorpha). Мы можем найти лучшую систему экспрессии для ваших уникальных биологических препаратов.
Мы собрали различные микробные хозяева с четкими источниками и стандартным CoA, в том числе E.coli экспрессия и экспрессия дрожжей.
Сервис Подробнее
|
Услуги
|
Сервис Подробнее
|
Минимальный срок/день
|
Результат
|
|
Конструкция штамма (E. coli)
|
Плазмидная трансформация (мультихозяева)
|
5
|
Сертификат подлинности коммерческих хостов Отчет о строительстве штамма
|
|
ПЦР-верификация
|
|
Очистка штамма
|
|
Сохранение штамма
|
|
Конструкция штамма (дрожжи)
|
Получение компетентных дрожжевых клеток
|
10
|
|
Линеаризация плазмиды
|
|
Электро трансформация
|
|
Скрининг резистентности/дефицита питательных веществ
|
|
Очистка штамма
|
|
Сохранение штамма
|
|
Подходящий скрининг хоста
|
Экстракция плазмидной или геномной ДНК
|
15-20
|
Процесс скрининга хозяев Сертификат подлинности сконструированных штаммов
|
|
ПЦР-верификация, расщепление рестриктазами
|
|
Секвенирование целевого гена
|
|
Скрининг хозяев с высокой экспрессией
|
|
Скрининг хозяев с генетической стабильностью
|
|
Сохранение штамма
|
Пример
Подходящий хозяин повышает уровень экспрессии белка в 2.5 раза.
Нам поручено развивать высокопроизводительные E. палочки напряжение. И мы попробовали три вида рекламы E. палочки хозяев, исходя из характеристик целевого белка. Показано, что штаммы S1-1 и S1-2 (рис. A: дорожки 1,2, 3.5) улучшали уровень белка в 3 раза, чем исходный штамм клиента (рис. A: дорожки XNUMX).
Кроме того, штамм S1-1 обладал высокой генетической стабильностью (рис. Б) и был признан штаммом-кандидатом для первичного банка клеток (PCB).
Наши особенности обслуживания
Подтвержденный опыт работы с различными микробными хозяевами, например, E. палочки DH5α, ТОП10, Транс10, BL21; П. пасторис SMD1168H, X-33, GS115, штамм PichiaPink1/2/3/4; С. cerevisiae и Х. полиморфа.
Мы имеем опыт работы с E. палочки периплазматическая секреция, экспрессия растворимых телец и телец включения, а также дрожжевая внутриклеточная экспрессия или экспрессия секрета. Мы не добавляем антибиотики или добавляем антибиотики в соответствии с нормативными требованиями.
Мы создаем высокопроизводительную платформу для скрининга высокопродуктивных и стабильных штаммов из более чем ста штаммов-кандидатов.
Гарантируется, что процесс разработки штаммов и скрининга отслеживается в соответствии с надлежащим управлением данными и записями.
RU
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕТ
PL
PT
RO
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
