Протеазы удаления тегов
Чтобы улучшить растворимость и упростить процесс очистки рекомбинантных белков, исследователи обычно добавляют слитые метки, из которых обычно используются His-метка, мальтозосвязывающий белок (MBP) и глутатион-S-трансфераза (GST).
Несмотря на то, что он помечен как дополнительная последовательность белка, его следует удалить для сохранения биологической активности в фармацевтической промышленности. Для удаления слитых меток требуются сайт-специфические протеазы, такие как энтерокиназа (EK), тромбин, протеаза вируса травления табака (TEVp), протеаза 3C риновируса человека (HRV3C), протеаза малого убиквитин-модифицирующего белка (SUMO), вирус пятнистости табачных вен ( TVMV) протеаза и карбоксипептидаза A/B (CPA/CPB).
Тип
|
Ферменты
|
Сайт признания
|
Эндопротеазы удаления меток
|
Энтерокиназа (ЕК), Энтеропептидаза
|
ДДДДК↓
|
тромбин
|
ЛВПР↓GS
|
TEV протеаза
|
ЭНЛИФК↓Г
|
HRV3C протеаза
|
ЛЕВЛФQ↓GP
|
СУМО-протеаза
|
Третичная структура СУМО
|
TVMV протеаза
|
ЭТВРФQG↓S
|
Удаление меток экзопротеаз
|
Карбоксипептидаза А (CPA)
|
С-концевые аминокислоты, кроме Pro, Lys и Arg.
|
Карбоксипептидаза B (CPB)
|
С-концевой Lys и Arg
|
Другие протеазы
сектор
|
Ферменты
|
Функция
|
Другие протеазы
|
Протеаза К
|
Сериновая протеаза, расщепляющая белки путем гидролиза пептидных связей.
|
IdeS, протеаза IgG
|
Ферменты, расщепляющие IgG (Ides), которые расщепляют специфический участок иммуноглобулина G (IgG), образуя фрагменты Fab и Fc.
|
протеаза IgA1
|
Протеолитический фермент, который расщепляет специфический участок в последовательности шарнирной области иммуноглобулина A1 человека (IgA1).
|
нуклеазы
сектор
|
Ферменты
|
Функция
|
нуклеазы
|
нуклеазы
|
Расщепляет нуклеиновые кислоты (ДНК или РНК) путем гидролиза фосфодиэфирных связей.
|
Ограничить фермент
|
Эндонуклеаза, расщепляющая ДНК в определенных участках или рядом с ними.
|
Амидаза
сектор
|
Ферменты
|
Функция
|
Амидаза
|
PNGase F
|
Расщепляет самые внутренние остатки GlcNAc и аспарагина в олигосахаридах с высоким содержанием маннозы, гибридных и сложных олигосахаридах.
|
Yaohai Bio-Pharma предлагает универсальное решение CDMO для ферментативного реагента