nterferon-β (IFN-β) nterferon-γ (IFN-γ)
DNA מיניקיירקל (mcDNA) הוא וקטור DNA קטן יותר שאיננו ויראלי, שמושג ממבנה דומה ל-DNA פלסמידי אב. הבדל בין DNA מיניקיירקל לבין DNA פלסמידי רגיל הוא שהראשון כולל רק את המופרור והגן של העניין (GOI), ללא נקודת הריבוי (ORI) וסימון בחירה (selMark). DNA מיניקיירקל מיוצר בבקטריה באמצעות שילוב חיוורי כדי להסיר סדרות נוספות (נקראים מיני-פלסמיד) מה-DNA הפלסמידי. בשל הבטחונו, הפך DNA מיניקיירקל לפופולרי כוקטור לא-וויראלי עבור תרפיה גנטית, חיסונים DNA וכו'.
תמונה 1. מבנה של DNA פלסמידי (pDNA) ו-DNA מיניקיירקל (mcDNA)
יש ארבעה מערכות עיקריות של שילוב חיוורי חיוורי של DNA מיניקיירקל שנדחווסו, כולל Integrase של Phage λ, Recombinase Cre של Phage P1, Resolvase ParA, PhiC31 Integrase / I-SceI.
סטרטגיה |
Integrase של Phage λ |
Recombinase Cre של Phage P1 |
Resolvase ParA |
PhiC31 Integrase / I-SceI |
מנגנון |
רקורסינאז טירוזין, שפועלת באמצעות הפרוטאינים FIS ו-IHF כדי לקטלז את רכיבת האתרים המעורבים att |
רקורסינאז טירוזין מותג-אתר, שמבצע רכיבה דו-כיוונית בעת חיבור לאתרים loxP |
רקורסינאז סרין, שמבצע רכיבה אי-הפיכה ובכיוון אחד בין שני אתרים זהים MRS |
רקורסינאז סרין, שמעדד רכיבה חד-כיוונית בין אתרי חיבור attP/attB, בעוד שהאנדונוקלאז I-SceI קוטע את המוצרים הקשורים והפלזמידים ההורים שלא התרכבו |
תכונות |
תלויים בביטוי של גורמי המארח FIS ו-IHF; רעלות פנימית; שאריות של הפלזמיד ההורה והמיני-פלזמיד |
שאריות של הפלזמיד ההורה והמיני-פלזמיד |
תוצר גבוה; שאריות של הפלזמיד ההורה והמיני-פלזמיד |
פירוק של הפלזמיד ההורה הקשור להקטנת התוצר |
[1] אלמיידה אמ, קיירוז גא, סוזה פ, סוזה Â. מיניקירקל דנה: העתיד עבור וקטורים מבוססי דנה? טרנדים ביו-טכנול. 2020 אוקט;38(10):1047-1051. doi: 10.1016/j.tibtech.2020.04.008.