nterferon-β (IFN-β) nterferon-γ (IFN-γ)
כדי לשפר את הפיצול ולהפשט את תהליך הטיהור של חלבונים רקורסנטיים, חוקרים בדרך כלל מוסיפים תגים מושלבים, שבהם His-tag, חלבון קשורה למלטוזה (MBP) ו-Glutathione-S-transferase (GST) הם בשימוש נפוץ.
על אף שהתגים הוספו כסדרה נוספת של חלבון, יש להסיר אותם כדי לשמור על פעילות ביולוגית בתעשיית התרופות. הסרת התגים המושלבים דורשת פרוטזות ספציפיות לאתר, כמו Enterokinase (EK), Thrombin, פרוטאזת Tobacco Etch Virus (TEVp), פרוטאזת Human Rhinovirus 3C (HRV3C), פרוטאזת SUMO, פרוטאזת Tobacco Vein Mottling Virus (TVMV) ו-Carboxypeptidase A/B (CPA/CPB).
סוּג |
אנזים |
אתר ההכרה |
פראזות אנדופפטידטיות להסרת תגים |
אנטרוקינאז (EK), אנטרופפטידאז |
DDDDK↓ |
טרומבין |
LVPR↓GS |
|
פראזת TEV |
ENLYFQ↓G |
|
פראזת HRV3C |
LEVLFQ↓GP |
|
פרוטאזת SUMO |
מבנה תלת-מימדי של SUMO |
|
פרוטאזת TVMV |
ETVRFQG↓S |
|
אקסופרוטאזות להסרת תג |
קרבוקסיפפטידז A (CPA) |
חומצות אמינו בקצה C, חוץ מ-Pro, Lys ו-Arg |
קרבוקסיפפטידז B (CPB) |
Lys ו-Arg בקצה C |
שימוש |
אנזים |
פונקציה |
פרוטאזות אחרות |
פרוטאזה K |
פרוטאזה בסרין שמסתכלת על חלבונים בהידרוליזה של קשרים פפטידיים. |
IdeS, פרוטאזה IgG |
אנזימים המลายים IgG (Ides) שמחלקים בנקודה ספציפית של אימונוגלובולין G (IgG), יוצרים את השברים Fab ו-Fc |
|
פרוטאזה IgA1 |
אנזים פרוטאוליטי שחותך אתר ספציפי בחלק המהופך של אימונוגלובולין A1 האנושי (IgA1). |
שימוש |
אנזים |
פונקציה |
נוקלאז |
נוקלאז |
מחלק חומצות גרעיניות (DNA או RNA) בהידרוליזה של הקשרים הפוספודיאסטריים. |
אנזים מגביל |
אנדונוקלאז שחותכת את ה-DNA בקרוב או באתר ספציפי. |
שימוש |
אנזים |
פונקציה |
אמידאז |
PNGase F |
חותך בין גלוקוזמין הפנימי ביותר ותאימות האספרטין של אוליגוסכרידים בעלי מנה גבוהה, היברידיים ומסובכים. |