Proteaze za uklanjanje oznaka
Kako bi poboljšali topljivost i pojednostavili proces pročišćavanja rekombinantnih proteina, istraživači obično dodaju fuzijske oznake, od kojih se obično koriste His-tag, protein koji veže maltozu (MBP) i glutation-S-transferaza (GST).
Iako je označen kao dodatni niz proteina, treba ga ukloniti kako bi se održala biološka aktivnost u farmaceutskoj industriji. Uklanjanje fuzijskih oznaka zahtijeva proteaze specifične za mjesto, kao što su enterokinaza (EK), trombin, proteaza virusa jetkanja duhana (TEVp), proteaza 3C ljudskog rinovirusa (HRV3C), proteaza malog ubikvitin modificirajućeg proteina (SUMO), virus pjegavosti duhanskih žila ( TVMV) proteaza i karboksipeptidaza A/B (CPA/CPB).
Tip
|
Enzim
|
Mjesto za prepoznavanje
|
Endoproteaze za uklanjanje oznaka
|
Enterokinaza (EK), Enteropeptidaza
|
DDDDK↓
|
trombina
|
LVPR↓GS
|
TEV proteaza
|
ENLYFQ↓G
|
HRV3C proteaza
|
LEVLFQ↓GP
|
SUMO proteaza
|
SUMO tercijarna struktura
|
TVMV proteaza
|
ETVRFQG↓S
|
Egzoproteaze za uklanjanje oznaka
|
karboksipeptidaza A (CPA)
|
C-terminalne aminokiseline, osim Pro, Lys i Arg
|
Karboksipeptidaza B (CPB)
|
C-terminalni Lys i Arg
|
Druge proteaze
primjena
|
Enzim
|
funkcija
|
Druge proteaze
|
Proteaza K
|
Serinska proteaza koja probavlja proteine hidrolizom peptidnih veza.
|
IdeS, IgG proteaza
|
IgG degradirajući enzimi (Ides) koji cijepaju na specifičnom mjestu imunoglobulina G (IgG), generirajući Fab i Fc fragmente
|
IgA1 proteaza
|
Proteolitički enzim koji cijepa specifično mjesto u sekvenci zglobne regije ljudskog imunoglobulina A1 (IgA1).
|
Nukleaza
primjena
|
Enzim
|
funkcija
|
Nukleaza
|
Nukleaza
|
Cijepa nukleinske kiseline (DNA ili RNA) hidrolizom fosfodiesterskih veza.
|
Ograničiti enzim
|
Endonukleaza koja cijepa DNA na određenim mjestima ili blizu njih.
|
Amidaza
primjena
|
Enzim
|
funkcija
|
Amidaza
|
PNGase F
|
Cijepa između najdubljeg GlcNAc i ostataka asparagina s visokim sadržajem manoze, hibridnih i složenih oligosaharida.
|
Yaohai Bio-Pharma nudi CDMO rješenje na jednom mjestu za enzimske reagense