Značaj skrininga sojeva
Probir prikladnih domaćina nužan je za razvoj CMC bioloških lijekova, koji određuju kvalitetu i dosljednost proizvoda i procesa proizvodnje. Izravni cilj skrininga domaćina je osigurati kandidatsku primarnu banku stanica (PCB), s visokim razinama ekspresije i visokom stabilnošću u smislu stabilnosti prolaza i stabilnosti skladištenja. Probir odgovarajućeg domaćina je neophodan iz dva glavna razloga:
- Prvo, odabrati mikrobnog domaćina s visokom razinom ekspresije. Postoji više komercijalno dostupnih sojeva koji se koriste za ekspresiju različitih vrsta proteina, poput toksičnih proteina, topivih proteina ili eukariotskih proteina.
- Drugo, pregledati domaćina s genetskom stabilnošću. Testiranje genetske stabilnosti ključna je točka tijekom životnog ciklusa proizvodnje. Predlaže se da je visoka genetska stabilnost prepoznata kao još jedna ključna karakteristika za odgovarajući soj.
Ključne riječi: selekcija mikrobnog soja, skrining mikrobnog soja, skrining bakterije ili kvasca visoke propusnosti, skrining soja visoke produkcije, skrining visoko stabilnog soja, skrining genetski stabilnog soja Primjena: humana medicina, medicina za životinje, cjepivo, sintetička biologija, rekombinantna velika molekula biologics, biološki reagens
Usluge skrininga sojeva tvrtke Yaohai Bio-Pharma
Koristeći više od 10 godina iskustva CDMO-a u mikrobnim biološkim lijekovima, podržavamo razvoj i proizvodnju raznih velikih molekula, uključujući rekombinantna podjedinična cjepiva, čestice slične virusu (VLP), hormone (inzulin, GLP-1, hormon rasta), citokine ( Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), faktori rasta (EGF, FGF, NGF), nanotijela/antitijela s jednom domenom (sdAbs), enzimi itd.
Prikupili smo bogato iskustvo u odabiru raznih vrsta plazmidnih vektora i mikrobnih domaćina, uključujući bakterije Escherichia coli (E. coli), i kvasac Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Možemo pronaći najbolji sustav ekspresije za vaše jedinstvene biološke lijekove.
Prikupili smo razne mikrobne domaćine s jasnim izvorima i standardnim CoA-om, uključujući E. coli ekspresiju i ekspresiju kvasca.
Pojedinosti usluge
|
Usluge
|
Pojedinosti usluge
|
Minimalna vremenska linija/dan
|
isporučeno
|
|
Konstrukcija soja (E. coli)
|
Transformacija plazmida (više domaćina)
|
5
|
COA komercijalnih hostova Strain konstrukcijsko izvješće
|
|
PCR verifikacija
|
|
Pročišćavanje soja
|
|
Očuvanje soja
|
|
Konstrukcija soja (kvasac)
|
Priprema kompetentnih stanica kvasca
|
10
|
|
Linearizacija plazmida
|
|
Elektro transformacija
|
|
Provjera otpornosti/nutritivnog nedostatka
|
|
Pročišćavanje soja
|
|
Očuvanje soja
|
|
Odgovarajući pregled domaćina
|
Ekstrakcija DNK plazmida ili genoma
|
15-20
|
Proces probira domaćina COA modificiranih sojeva
|
|
PCR verifikacija, probava restrikcijskim enzimima
|
|
Sekvenciranje ciljnog gena
|
|
Probir domaćina visoke ekspresije
|
|
Probir domaćina s genetskom stabilnošću
|
|
Očuvanje soja
|
Case study
Odgovarajući domaćin poboljšava razinu ekspresije proteina za 2.5 puta.
Naručeni smo za razvoj visokoproizvodnih E. coli naprezanje. I isprobali smo tri vrste reklama E. coli domaćina, na temelju karakteristika ciljnog proteina. Pokazalo se da su sojevi S1-1 i S1-2 (Slika A: Staza 1,2, 3.5) poboljšali razinu proteina do 3 puta od početnog soja klijenta (Slika A: Staza XNUMX).
Osim toga, soj S1-1 pokazao je visoku genetsku stabilnost (slika B), te je prepoznat kao soj kandidat za primarnu banku stanica (PCB).
Naše značajke usluge
Dokazana stručnost s različitim mikrobnim domaćinima, npr. E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink soj 1/2/3/4; S.cerevisiae i H. polimorfa.
Imamo iskustva s E. coli periplazmatična sekrecija, ekspresija topljivih i inkluzijskih tjelešaca, kao i intracelularna ekspresija ili ekspresija sekrecije kvasca. Ne dodajemo antibiotike ili ih dodajemo prema regulatornim uputama.
Uspostavljamo platformu za probir visoke propusnosti za probir visokoproduktivnih i stabilnih sojeva od preko sto sojeva kandidata.
Osigurano je da je proces inženjeringa soja i probira sljediv, u skladu s dobrim upravljanjem podacima i zapisima.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
