Plazmidna DNA, kao vitro transkripcijski (IVT) predložak, važna je sirovina za proizvodnju mRNA. Visoki prinos, visoko pročišćavanje i visoko obnavljanje plazmidne DNA su glavni cilj tijekom razvoja plazmidnog procesa.
Yaohai Bio-Pharma pruža rješenje na jednom mjestu za razvoj plazmida, uključujući razvoj procesa uzvodno (fermentacija), nizvodno (pročišćavanje), karakterizaciju procesa i validaciju procesa. Imamo veliko iskustvo u poboljšanju prinosa plazmida i njegovom izdvajanju iz složenih matrica razvojem i optimiziranjem procesa fermentacije, pročišćavanja i uklanjanja nečistoća.
Osnovni bioproces za proizvodnju plazmida uključuje: Escherichia coli (E. coli) fermentacija, žetva stanica i alkalna liza, bistrenje, koncentracija, kromatografski proces u tri koraka (hvatanje, međupročišćavanje i poliranje) i koncentracija.
Pojedinosti usluge | Operacije jedinice | Parametri |
E. coli vrenje |
Protresite tikvicu | Sastav medija, antibiotik, volumen inokuluma, temperatura rasta itd. |
fermentor (7 L) |
Antibiotik, volumen inokuluma, temperatura rasta, pH, otopljeni kisik (DO), način hranjenja (npr. šarža s hranjenjem), medij za hranjenje, vrijeme fermentacije itd. |
|
Žetva stanica | mikrofiltriranjc | Servo E. coli proces berbe |
Liza stanica | Resuspendiranje stanica, alkalna liza, neutralizacija | Alkalni omjer, vrijeme lize |
Razjašnjenje | Filtracija | Sirova filtracija, niz filtara od 20 µm i 5 µm (poželjno) |
Koncentracija | Ultrafiltracija, tangencijalna filtracija protoka | Veličina pora (ili NMWC), transmembranski tlak (TMP), protok, omjer volumena filtrata i površine membrane |
Kromatografija u tri koraka | Kromatografija isključenja veličine (SEC) ili gel filtracijska kromatografija (GFC) | Duljina i promjer kolone, sastav pufera, volumen injekcije, sastav mobilne faze (adsorpcija i desorpcija), pH, brzina protoka, ekvilibracija, uvjeti vezanja, ispiranja i eluiranja. |
Afinitetna kromatografija (AF) | ||
Kromatografija anionske izmjene (AEX) | ||
Koncentracija | Ultrafiltracija, tangencijalna filtracija protoka | Veličina pora (ili NMWC), transmembranski tlak (TMP), protok, omjer volumena filtrata i površine membrane |
Više rješenja procesa pročišćavanja bioloških lijekova |