Proizvodi dobiveni in vitro ciklizacijom i obogaćivanjem RNazom R zahtijevaju daljnje uklanjanje iz in vitro transkripcije (IVT), uključujući nepotrošene supstrate u reakciji ciklizacije, nusprodukte reakcije i izrezanu RNA.
Yaohai Bio-Pharma ima zrelo taloženje LiCl, pročišćavanje magnetskim kuglicama, vlastito razvijeno pročišćavanje i druga raznolika rješenja za pročišćavanje za učinkovito uklanjanje različitih nečistoća i pripremu visoko čiste circRNA.
Otopina za pročišćavanje malih količina circRNA za transfekciju stanica i kao dio pokusa na životinjama.
Otopina za pročišćavanje malih količina circRNA za transfekciju stanica i kao dio pokusa na životinjama.
Scenariji primjene više kvalitete;
Stabilan i skalabilan proces pročišćavanja za ispunjavanje GMP proizvodnih zahtjeva.
Proces | Dodatna usluga | Pojedinosti usluge | Razdoblje isporuke (dan) | isporučeno |
circRNA pročišćavanje | Konvencionalna otopina za pročišćavanje | Taloženje litijeva klorida | 1 | circRNA ljekovita tvar |
Pročišćavanje magnetskim kuglicama | ||||
Visoko čisto pročišćavanje circRNA | Preparativna tekućinska kromatografija visoke učinkovitosti (HPLC) | 1-2 | ||
Razmjena međuspremnika | ultrafiltracija | 1 | ||
circRNA kontrola kvalitete | Koncentracija/pročišćavanje | Ultraljubičasta (UV) spektrofotometrija | 0.5 | Izvješće o ispitivanju |
Čistoća | Elektroforeza u agaroznom gelu (AGE)/E-gel | |||
HPLC-izborno | 1 |
Scenariji primjene mogu se postići.
circRNA s čistoćom većom od 90%;
Kroz strogu kontrolu RNaza u eksperimentalnom okruženju i potrošnom materijalu, degradacija RNK je učinkovito spriječena.
Yaohai Bio-Pharma uspostavila je zrelu otopinu za pročišćavanje circRNA koja može učinkovito ukloniti razne nečistoće povezane s procesom.
Produkti kružne RNA pročišćeni konvencionalnom otopinom još uvijek su očito pomiješani s izrezanom RNA i intronima.
Nakon otopine za pročišćavanje koju je razvila tvrtka Yaohai Bio-Pharma, različite nečistoće linearne RNK, kao što su izrezana RNK i introni, mogu se uspješno ukloniti.
Validacija ekspresije circRNA
Upotrebom konvencionalnog liposoma, pročišćena eGFP circRNA transfektirana je u 293T stanice, a fluorescentni signal se opaža nakon 24 sata i nastavlja se pojačavati nakon 48 sati. Signal fluorescencije još uvijek se može detektirati 7. dan i 14. dan nakon transfekcije.