Proces |
Dodatna usluga |
Pojedinosti usluge |
Razdoblje isporuke (radni dan) |
isporučiv |
Dizajn i optimizacija sekvenci mRNA |
Dizajn i optimizacija sekvenci kodiranja |
Dizajn CDS sekvence i optimizacija kodona |
1-3 |
Datoteka sekvence |
Dizajn i optimizacija nekodirajućih sekvenci |
Dizajn i optimizacija UTR, polyA sekvenci |
Transkripcijski šablon Priprema plazmida |
Priprema rekombinantnog plazmida |
Sinteza gena |
7-10 |
Amplifikacija i ekstrakcija plazmida |
4 |
Linearizacija i pročišćavanje plazmida |
mRNA in vitro transkripcija |
Kotranskripcijsko ograničavanje (metoda u jednom koraku) |
In vitro transkripcija (IVT) / Cap analog |
1-2 |
N / A |
Nukleotidne modifikacije (UTP/CTP modifikacije) |
Uklanjanje DNK predloška (DNase I) |
Enzimsko zatvaranje (proces u dva koraka) |
IVT |
2-3 |
Nukleotidne modifikacije (UTP/CTP modifikacije) |
Uklanjanje DNK predloška (DNase I) |
pročišćavanje mRNA (litijev klorid/magnetska zrnca) |
Enzimsko zatvaranje |
Pročišćavanje mRNA |
Konvencionalna shema pročišćavanja |
Taloženje litijeva klorida |
1 |
mRNA ljekovita tvar |
Pročišćavanje magnetskim kuglicama |
Shema pročišćavanja kromatografske kolone |
Kombinacija više kromatografskih metoda |
1-2 |
Razmjena međuspremnika |
ultrafiltracija |
1 |
Liofilizacija mRNA |
Liofilizacija |
Prethodno zamrzavanje |
2-3 |
mRNA liofilizirani prah |
Primarno sušenje (sublimacija) |
Sekundarno sušenje (desorpcija) |
mRNA enkapsulacija |
LNP inkapsulacija |
LNP inkapsulacija |
2-3 |
mRNA-LNPDrug proizvod |
Koncentracija i izmjena pufera |
Analiza kvalitete mRNA |
mRNA ljekovita tvar/liofilizirani prah |
Koncentracija, čistoća |
1 |
Test Report |
Integritet, učinkovitost zatvaranja, distribucija poliA repa |
2-5 |
mRNA-LNP ljekoviti proizvod |
Učinkovitost enkapsulacije |
1 |
Veličina i raspodjela čestica |
Površinski naboj |
Validacija ekspresije mRNA |
Procjena 293T stanica |
Oblaganje ćelija |
4 |
Prolazna transfekcija stanica |
Promatranje fluorescentnog signala |
1-3 |
Western blot (WB)/enzimski imunoanaliza (ELISA) |