U procesu pripreme in vitro transkripcije (IVT) mRNA, linearni plazmidni DNA je potreban kao šablon za transkripciju IVT uz pomoć T7 RNA polimeraze. Visokokvalitetni plazmidni DNA ključan je za in vitro transkripciju.
Na temelju zrele platforme usluge pripreme plazmida, Yaohai Bio-Pharma može ponuditi uslugu pripreme linearnog plazmidnog DNA visoke čistoće i standarda kako bi se postigla učinkovita IVT transkripcija.
Detalji usluga
| Proces |
Opcionalna usluga |
Detalji usluge |
Rok Izrade (radni dan) |
| Priprema cirkularnog plazmida |
Sinteza gene |
Sinteza Geneova (Trece strane) |
7-10 |
| Uvećanje Plazmida |
Uvećanje Plazmida |
2 |
| Izlučivanje Plazmida |
| Priprema Linearnog Plazmida |
Linearizacija i očišćenje plazmida |
Linearnizacija plazmida |
1 |
| Ciscenje Linearnog DNA-a |
| Kontrola kvaliteta plazmidne DNK |
Koncentracija čistoće |
Ultravijoletna (UV) spektrofotometrija |
1-2 |
| Plazmidna konformacija |
Elektroforeza na agarosnom geлу (AGE) |
| Kapilarna elektroforeza (CE) - opcionalno |
| Identifikacija plazmida |
Identifikacija restrikcijskog enzima / AGE |
Naše značajke
G fleksibilan odabir metoda linearizacije
Optimizacija metoda izlučivanja i očišćavanja DNA kako bi se postigle visoke stope oporavka.
- Stroga kontrola kvalitete
Strogost standarda procesa kontrole, sa stopom superhelikalne konformacije uzorka plazmida za istraživanje preko 80%.
- Dovršeni platformski proces
Visoki standardi i visokaeefikasna usluga pripreme plazmida i kontroliranja kvaliteta kako bi se ispunile eksperimentalne potrebe.
Studija slučaja
Uzevši kao primjer proizvod Yaohai Bio-Pharma katalog mRNA_luciferase, uzorak šablonskog plazmida (istraživački razred) ima superhelikalnu omjeru preko 90%, linearni omjer blizu 100%, a zatim transkripcijski omjer do 1:200 (linearni plazmidni DNA:mRNA).
MRNA_luciferase dobiven kroz pripremu linearnog plazmida kao šablona transficira se u 293T stanice, a aktivnost enzim-substratne reakcije se procjenjuje 24 sata nakon transfekcije.
Može se otkriti jaka luciferaza aktivnost signala, odnosno da se luciferaza proteina efikasno izražava, što sugerira da čistoća transkripcione šablone može potpuno zadovoljiti zahtjeve visokokvalitetne mRNA pripreme.
Ocjena omjera superkotiranih plazmida
Potvrda izražavanja luciferaze mRNA in vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
