Sve kategorije
Priprema proteina bez oznake

Priprema proteina bez oznake

Oznake proteina, kao fuzijski partneri koji se koriste u rekombinantnim DNS tehnologijama, omogućuju učinkovitu, jednokoraknu afinitetnu čišćenju različitih proteina/peptida s različitim karakteristikama. Nazad ovom važnoj prednosti, oznake kao vanjski aminokiseline mogu promijeniti strukturu proteina i njegove biološke funkcije. Stoga su proteini ili peptidi bez oznaka (tag-free) više poželjni kako bi se osigurala sigurnost i učinkovitost, posebno u biofarmaceutskoj oblasti. Rekombinantnom proteinu s fuzijskom oznakom ima ograničene mogućnosti za dobivanje odobrenja od medicinskih/farmaceutskih uprava.

Na temelju platforme za razvoj mikrobioloških biopreparata, Yaohai Bio-Pharma pruža prilagođene usluge pripreme proteina bez oznaka posvećene ispunjavanju jedinstvenih ciljeva za istraživanje, razvoj i proizvodnju za kliničku uporabu.

Ključne riječi: proizvodnja proteina bez oznake, čišćenje proteina bez oznake, priprema proteina temeljena na oznaci, izražavanje proteina bez oznake i čišćenje, ciljni protein uglavnom bez oznake

Primjena: istraživanje ljudske medicine, razvoj životinjske medicine, razvoj rekombinantnih cjepiva, proizvodnja rekombinantnih velikomolekularnih bioloških sredstava

Naša mikrobiološka platforma R&D

Imamo iskustva u inženjerstvu mikrobioloških vrsta, fermentaciji i čišćenju produkata.

Bakterije: Escherichia coli (E. coli)

Kvasinice: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Prilagođene opcije
Modalitet Rekombinantni protein
Početni materijali Nizovi gena, rekombinantni plazmidi ili inženirane štede
Isporučivi Očistiti: >80%, >85%, >90% Količina: 0.2~10 g (bit će određeno prema projektu)
Sustav izražavanja i oblikovanje

E. coli sekreacija u periplazmu, rastvorljivo i izražavanje inkluzijskih tijela;

Yeast unutar stanice ili sekretno izražavanje

Metode analize Ultraljubičasto zračenje (UV), asociranje s bicinonatnom kiselinom (BCA), Bradford ili Lowry za količinu
Elektroforeza u gelu poliacrilamida s natrijevom dodecilsulfat (SDS-PAGE) za testiranje čišćenja
Opcionalno: Western blots (WB), enzim-povezani imunossorbentni test (ELISA), visokoprora tekuća hromatografija (HPLC)
Ostale nečistoće Endotoksin (opcionalno)
Detalji usluge

Usluge

Detalji usluge

Minimalni vremenski plan (radni dan)

Sinteza gene

Optimizacija kodona za određeni izrazni domaćin

7~10 dana

Sinteza gene

Konstrukcija plazmida/vektora

Kloniranje u plazmid/vektor

2 dana

Transformacija plazmida

Potvrda polimerazne lančane reakcije (PCR), restrikcijska enzimaška digestija, sekvenciranje gene

3 dana

Izraz proteina u E. coli

Transformacija plazmida,

2 dana

Kultiviranje u šeširanoj flaši

3 dana

fermentacija u 7L skali, optimizacija

4 dana / serija

Očišćenje proteina bez oznake, optimizacija

5~10 dana / serija

Testiranje elektroforezom u poliacrilamidnoj gelatini s natrijum-dodecilsulfat (SDS-PAGE)

Izraz proteina u kvasinama

Priprema kompetentnih kvasinki

4 dana

Linearizacija plazmida i elektro-transformacija

fermentacija u 7L skali, optimizacija

5 dana

Očišćenje proteina bez oznake, optimizacija

7 dana / serija

Čišćenje proteina bez oznake

5~10 dana / serija

Kontrola kvalitete po SDS-PAGE

Dodatne usluge (opcionalno)
Zatražite besplatnu ponudu

Get in touch