Yaohai Bio-Pharma nudi testiranje N-terminalne sekvence i usluge analize podataka na temelju tekućinske kromatografije-masene spektrometrije (LC-MS) ili Edmanove metode razgradnje, koja vam omogućuje određivanje aminokiselina na odgovarajućim krajevima proteina od interesa. Modifikacija N-terminala također se može analizirati pomoću LC-MS.
Sudjelovali smo u strukturnoj karakterizaciji proteina raznih velikih molekula, uključujući rekombinantna podjedinična cjepiva, nanotijela/VHH/protutijela s jednom domenom (sdAbs), fragmente antitijela, hormone/peptide, citokine, faktore rasta (GF), enzime, kolagene, itd.
Regulatorni zahtjevi za N terminalno sekvenciranje
Prema smjernicama ICH Q6B, potrebno je potvrditi sekvencu vašeg proteina i ispitati završetke radi eventualne varijacije.
N Terminalne metode sekvenciranja
Analiza |
način |
N-terminalno sekvenciranje |
Edmanova degradacija, tekućinska kromatografija-masena spektrometrija (LC-MS) |
Procedure
LC-MS
1. Proteinsko N-terminalno fluorescentno označavanje
2. Višestruka probava
3. LC-MS/ analiza masenom spektrometrijom (MS).
Edmanova degradacija
1. Natrijev dodecil sulfat (SDS) gel elektroforeza vašeg ciljanog proteina
2. Prijenos gela na membrane od poliviniliden fluorida (PVDF) i bojenje
3. Identificirajte i odrežite ciljnu proteinsku vrpcu
4. Edmanovo sekvenciranje N-kraja
5. Analiza podataka