Disulfidne veze ponekad se nazivaju SS veze ili disulfidni mostovi. Disulfidni mostovi utječu na bioaktivnost bioloških lijekova, poput peptida, proteina i antitijela.
Yaohai Bio-Pharma nudi usluge analize disulfidnih veza uglavnom temeljene na tekućinskoj kromatografiji-masenoj spektrometriji (LC-MS).
Sudjelovali smo u strukturnoj karakterizaciji proteina raznih velikih molekula, uključujući rekombinantna podjedinična cjepiva, nanotijela/VHH/protutijela s jednom domenom (sdAbs), fragmente antitijela, hormone/peptide, citokine, faktore rasta (GF), enzime, kolagene, itd.
Regulatorni zahtjevi za disulfidne veze
Postoje različiti brojevi i formacije disulfidnih mostova u različitim biološkim lijekovima, što bi trebalo u potpunosti procijeniti tijekom studija karakterizacije proteina ako očekivani primarni slijed aminokiselina proizvoda sadrži aminokiselinu cistein. To također zahtijeva regulatorni dokument ICH Topic Q6B.
Analitičke metode
Analiza |
Metode |
Disulfidne veze |
Tekućinska kromatografija-masena spektrometrija (LC-MS) nakon digestije |
Za potrebne podatke za punu procjenu disulfidnih mostova i slobodnih tiola, znanstvenici iz Yaohai Bio-pharma provode mapiranje peptida nakon probave sa specifičnom proteazom. Nakon toga analizirajte pomoću on-line LC/elektrosprejne ionizacijske masene spektrometrije (ES-MS) i/ili LC/ES-MS/MS prije i nakon redukcije.
Yaohai Bio-pharma također može provesti Ellmanov test, koji je važan dio svake procjene proizvoda koji u potpunosti sadrži cistein. Unutar Ellmanovog testa, derivatiziramo sulfhidril pomoću (5,5'-ditio-bis- [2-nitrobenzojeve kiseline]). Kako bi se odredile razine slobodnih tiola, dobiveni produkt se analizira UV spektrofotometrijom na 412 nm.