Profiling N-glikana je ključan za proizvodnju biofarmaceutske. Yaohai Bio-Pharma pruža uslugu profilinga N-glikana pomoću tekućeg hromatografije-masene spektroskopije (LC-MS) otpuštenih i označenih glikana. Opće korake za pripremu uzorka N-glikana uključuju razbijanje glikoproteina (GP), de-glikozacijon, čišćenje, označavanje/derivaciju i čvrsto-faznu ekstrakciju (SPE).
Bili smo angažirani u karakterizaciji strukture proteina različitih velikih molekula, uključujući Rekombinantne Podjedinične Cijepe, Nanotijele/VHHs/Jednodomene Antitijela (sdAbs), Odlomke Antitijela, Hormone/Peptidi, Cytokine, Rastni Faktori (GF), Enzime, Kolačaste Tkanine itd.
Uredbe za Profiling N-Glikana
Prema smjernici ICH Q6B, „za glikoproteine određuje se sastojak ugljikohidrata (neutralna šećera, aminoshecera i sijalične kiseline). Pored toga, analizira se struktura lanaca ugljikohidrata, uzorak oligosaharida (antenski profil) i mjesto glikozacije polipeptidskog lanca u najvećem mogućem obimu.
Analitička metoda
| Analiza |
Metode |
| Profiling N-glikana |
Analiza otpuštenih i oznakivanih glikana tečnom hromatografijom-masno spektrometrijom (LC-MS) |
Postupci
1. Enzimatsko otpuštanje glikana s Peptide N-Glikozidaz F (PNGase F)
2. Derivacije otpuštenih glikana 2-aminobenzamidom (2-AB)
3. Čišćenje skupljenih N-glikana na stupcu TSK Amide - 80 ako su prisutne velike količine detergenta, nevolatilnih soli ili tvari s slobodnim aminogrupama
4. Oznakivanje fluoroaktivnim 2-aminobenzamidom (2-AB)
5. LC-MS analiza oznakivanih N-glikana
6. - Što? Analiza podataka
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
