Enzimski reagens

Enzimski reagens

Modalitet

Proteaze za uklanjanje oznaka

Kako bi poboljšali topljivost i pojednostavili proces pročišćavanja rekombinantnih proteina, istraživači obično dodaju fuzijske oznake, od kojih se obično koriste His-tag, protein koji veže maltozu (MBP) i glutation-S-transferaza (GST).

Iako je označen kao dodatni niz proteina, treba ga ukloniti kako bi se održala biološka aktivnost u farmaceutskoj industriji. Uklanjanje fuzijskih oznaka zahtijeva proteaze specifične za mjesto, kao što su enterokinaza (EK), trombin, proteaza virusa jetkanja duhana (TEVp), proteaza 3C ljudskog rinovirusa (HRV3C), proteaza malog ubikvitin modificirajućeg proteina (SUMO), virus pjegavosti duhanskih žila ( TVMV) proteaza i karboksipeptidaza A/B (CPA/CPB).

Tip	Enzim	Mjesto za prepoznavanje
Endoproteaze za uklanjanje oznaka	Enterokinaza (EK), Enteropeptidaza	DDDDK↓
	trombina	LVPR↓GS
	TEV proteaza	ENLYFQ↓G
	HRV3C proteaza	LEVLFQ↓GP
	SUMO proteaza	SUMO tercijarna struktura
	TVMV proteaza	ETVRFQG↓S
Egzoproteaze za uklanjanje oznaka	karboksipeptidaza A (CPA)	C-terminalne aminokiseline, osim Pro, Lys i Arg
Egzoproteaze za uklanjanje oznaka	Karboksipeptidaza B (CPB)	C-terminalni Lys i Arg

Druge proteaze

primjena	Enzim	funkcija
Druge proteaze	Proteaza K	Serinska proteaza koja probavlja proteine hidrolizom peptidnih veza.
	IdeS, IgG proteaza	IgG degradirajući enzimi (Ides) koji cijepaju na specifičnom mjestu imunoglobulina G (IgG), generirajući Fab i Fc fragmente
	IgA1 proteaza	Proteolitički enzim koji cijepa specifično mjesto u sekvenci zglobne regije ljudskog imunoglobulina A1 (IgA1).

Nukleaza

primjena	Enzim	funkcija
Nukleaza	Nukleaza	Cijepa nukleinske kiseline (DNA ili RNA) hidrolizom fosfodiesterskih veza.
Nukleaza	Ograničiti enzim	Endonukleaza koja cijepa DNA na određenim mjestima ili blizu njih.

Amidaza

primjena	Enzim	funkcija
Amidaza	PNGase F	Cijepa između najdubljeg GlcNAc i ostataka asparagina s visokim sadržajem manoze, hibridnih i složenih oligosaharida.

sve kategorije

Enzimski reagens

Modalitet