Sve kategorije
Minikrug DNA

Modalitet

Minikrug DNA

Minicircle DNA (mcDNA) je manji neviralni DNS vektor izveden iz strukture roditeljskog plazmidnog DNS-a. Minicircle DNA se razlikuje od konvencionalnog plazmidnog DNS-a time što sadrži promotor i interesnu gensku jedinicu (GOI), bez replikacijskog početka (ORI) i selekcije oznake (selMark). Minicircle DNA proizvodi se u bakterijama putem rekombinacije in vivo kako bi se uklonile dodatne sekvence (zovene mini-plazmidi) s plazmidnog DNS-a. Zbog svoje sigurnosti, minicircle DNA postao je popularan kao neviralni vektor za genetsku terapiju, DNS cjepiva itd.

图片

Slika 1. Struktura Plazmidnog DNS-a (pDNA) i Minicircle DNS-a (mcDNA)

Sustavi rekombinacije Minicircle DNS-a

Postoji četiri glavna sustava in vivo rekombinacije minicircle DNS-a koji su proučavana, uključujući Phage λ integrase, Phage P1 Cre rekombinaze, ParA resolvaze, PhiC31 integrase/I-SceI.

Strategija

Phage λ integrase

Phage P1 Cre rekombinase

ParA resolvase

PhiC31 integrase/I-SceI

Mehanizam

Tyrosin rekombinaza, koja funkcioniše putem proteina FIS i IHF kako bi katalizirala rekombinaciju att hibridnih lokacija

Lokus-specifična tyrosin rekombinaza, koja obavlja dvostruku rekombinaciju pri vezivanju za lokuse loxP

Serin rekombinaza, koja obavlja nepovratnu i jednosmjernu rekombinaciju između dvije identične MRS lokacije

Serin rekombinaza, koja medijira jednosmjerne rekombinacije između lokacija attP/attB, dok I-SceI endonukleaza štapi proizvod-povezane nečistine i nererekombinirane roditeljske plazmidu

Značajke

Ovisi o izrazu faktora domaćina FIS i IHF; unutrašnja toksičnost; Ostatak roditeljskog plazmida i mini-plazmida

Ostatak roditeljskog plazmida i mini-plazmida

Visoka dobivenost; Ostatak roditeljskog plazmida i mini-plazmida

Degradacija roditeljskog plazmida povezana je s umanjivom dobivenošću

Yaohai Bio-Pharma Ponudi Jedno-Mjerno Rješenje CDMO za Minikružni DNA
Referenca:

[1] Almeida AM, Queiroz JA, Sousa F, Sousa Â. Minikružni DNA: Je li to budućnost DNS baziranih vektora? Trends Biotechnol. 2020 Oct;38(10):1047-1051. doi: 10.1016/j.tibtech.2020.04.008.

Zatražite besplatnu ponudu

Get in touch