Ključni enzymi za proizvodnju dugog RNA
mRNA, kao vrsta dugačkog kodiranog RNA-a, bezbedno i učinkovito je djelovala na širu populaciju tijekom pandemije COVID-19. Ostali dugokodirani RNK-ovi, poput samoopćeg RNK-a (saRNA) i cirkularnog mRNA-a (circRNA), također su pokazali učinkovitost u prekliničkim i kliničkim studijama.
Velikomjerno proizvodnja dugokodiranog RNA ovisi o transkripciji in vitro (IVT) putem nekoliko enzimatskih reakcija. Koraci u proizvodnji RNA uključuju pripremu šablon-DNA, sintezu IVT-RNA, cirkulaciju, uklanjanje DNA, modifikaciju RNA (zaglavljanje i dodavanje repa) i čišćenje RNA.
Postoji nekoliko ključnih enzima koji se koriste u proizvodnji dugokodiranog RNA (npr. mRNA, saRNA i circRNA), uključujući restriktivne endonukleaze, T7 RNA polimerazu (T7 RNAP), inhibitor RNaze, inorganičku pirofosfatuzu, DNaze I, vakcinijevu zaključavajuću enzimu i RNazu R.
|
Proces
|
Enzim
|
Funkcija
|
|
Priprema šablona DNA
|
Restrikcijske endonukleaze
|
Linearizacija plazmidne DNA (pDNA) kako bi se spriječilo stvaranje dužeg transkripta.
|
|
Sinteza RNK u IVT procesu
|
T7 RNA polimeraza (T7 RNAP)
|
Poveži se s promotorom T7 i stvori specifični transkript RNK; Igra ključnu ulogu tijekom reakcije IVT.
|
|
Inhibitor RNase, rekombinantni
|
Inhibicija aktivnosti RNase tijekom IVT reakcije.
|
|
Pirofosfatasa, inorganična (iPPase)
|
Spriječavaju pirofosfat tijekom IVT reakcije.
|
|
Uklanjanje DNA
|
DNase I
|
Ukloni DNA šablon.
|
|
Modifikacija RNA
|
Vaccinia zaklanjeći enzim
|
Dodajte Cap1 strukture na 5′ krajeve IVT mRNA.
|
|
2’-O-Metiltransferaza
|
| obogaćenje circRNA |
RNase R |
Degradiraj linearnu RNA i oboj obogatiti cirkularnu RNA. |
Yaohai Bio-Pharma Ponudi Jedinučanstveno Rješenje CDMO za Enzime
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
