Enzimski reagens

Enzimski reagens

Modalitet

Proteazi za uklanjanje oznaka

Da bi se poboljšala rastvorljivost i pojasnio proces čišćenja rekombinantnih proteina, istraživači obično dodaju fuzijske oznake, od kojih su His-oznaka, maltazni vezivički protein (MBP) i glutation-S-transferaza (GST) često korištene.

Iako je označena kao dodatni niz proteina, treba ju ukloniti kako bi se održao biološki aktivnost u farmaceutskoj industriji. Uklanjanje fuzijskih oznaka zahtjeva sitovito djelujuće proteaze, poput enterokinaze (EK), trombina, proteaze tabakove izrezane bolesti (TEVp), ljudske rineovirusne proteaze 3C (HRV3C), male ubiquitin modificirajuće proteze (SUMO) proteaze, proteaze tabakove žiljavinske mrlje (TVMV) i karboxipeptidaze A/B (CPA/CPB).

VRSTA	Enzim	Prepoznavni pojas
Endoproteaze za uklanjanje oznaka	Enterokinaza (EK), enteropeptidaza	DDDDK↓
	Trombin	LVPR↓GS
	TEV proteaza	ENLYFQ↓G
	HRV3C proteaza	LEVLFQ↓GP
	SUMO proteaza	SUMO tercijarna struktura
	TVMV proteaza	ETVRFQG↓S
Exoproteaze za uklanjanje oznaka	Karboxipeptidaza A (CPA)	Krajnji aminokiseline na C-strani, osim Pro, Lys i Arg
Exoproteaze za uklanjanje oznaka	Karboxipeptidaza B (CPB)	C-terminal Lys i Arg

Ostale proteaze

PRIMJENA	Enzim	Funkcija
Ostale proteaze	Proteaza K	Serinska proteaza koja razgrizava proteine hidroliziranjem peptidskih veza.
	IdeS, IgG proteaza	Enzimi koji degradiju IgG (IdeS) i štisu na specifičnom mjestu imunoglobulina G (IgG), stvarajući Fab i Fc fragmente
	IgA1 proteaza	Proteolitični enzim koji štapi određeno mjesto u nizu hlace regije ljudske imunoglobuline A1 (IgA1).

Nukleaza

PRIMJENA	Enzim	Funkcija
Nukleaza	Nukleaza	Preseka nukleinske kiseline (DNA ili RNA) hidroliziranjem fosfodiesterovih veza.
Nukleaza	Ograničavajući enzim	Endonukleaza koja preseca DNA uz ili blizu određenih lokacija.

Amidaza

PRIMJENA	Enzim	Funkcija
Amidaza	PNGase F	Štapi između unutarnjeg GlcNAca i asparaginskih restova visokomannoznih, hibridnih i kompleksnih oligosaharida.

Sve kategorije

Enzimski reagens

Modalitet