Wszystkie kategorie
Rekombinowany enzym

Rekombinowany enzym

Home >  Modalność  >  Białka  >  Rekombinowany enzym

Modalność

Rekombinowane enzymy

Rekombinowany enzym do użytku terapeutycznego

Enzymy lecznicze otrzymywane w procesach biotechnologicznych są szeroko stosowane w kilku zastosowaniach klinicznych, w tym w enzymatycznej terapii zastępczej, degradacji nagromadzonych metabolitów i toksyn, leczeniu raka i edycji genomu. W mikrobiologicznym układzie ekspresyjnym można wytwarzać kilka enzymów terapeutycznych.

Zastosowanie

Enzymy

Substancja

Typowe produkty/rurociągi

Enzymatyczna terapia zastępcza

Deaminaza adenozyny, ADA

Adenozyna lub deoksyadenozyna

Elapegademaza-lvlr (Revcovi)

Liaza fenyloalanino-amoniakalna, PAL

Fenyloalanina

Pegvaliase-pqpz (Palynziq)

Degradacja nagromadzonych metabolitów

Urykaza/oksydaza moczanowa

Kwas moczowy

Pegltykaza (Krystexxa) Rasburykaza (Fasturtec)

Kolagenaza

Kolagenowa „blizna”

Kolagenaza Clostridium histolyticum (Xiaflex, Qwo, Santyl)

Skrócona plazmina

Kolagen, fibronektyna i laminina

Okryplazmina (Jetrea)

Aktywator plazminogenu ze skróconej tkanki (tPA)

Plazminogen

Reteplaza (retawaza)

Proteaza IgG

Immunoglobulina G (IgG)

Imlifidaza (Idefrix)

Proteaza IgA

Immunoglobulina A (IgA)

Proteaza PKU308/AP308IGAN IgA

Degradacja toksyn

Karboksypeptydaza G2

Metotreksat

Glukarpidaza (Voraxaze)

Lek na raka

Enzym specyficzny dla asparaginy

Asparagina

Asparaginaza (Elspar)Calaspargase pegol-mknl (Asparlas)

Edycja genomu

Nukleaza Cas9

Gen docelowy

Exagamglogene autotemcel (Exa-cel, CTX001)

Rekombinowany enzym jako materiał

Istnieje kilka enzymów wykorzystywanych w produkcji długo kodującego RNA (np. mRNA, saRNA, circRNA), produkcji koniugatów przeciwciało-lek (ADC) i innych. Enzymy wytwarzane przez drobnoustroje są bardziej opłacalne niż komórki ssacze, zwłaszcza system ekspresyjny E. coli.

Zastosowanie

Enzymy

Funkcjonować

Enzymy do liniowej produkcji RNA, wolne od RNaz

Endonukleazy restrykcyjne

Linearyzacja plazmidowego DNA (pDNA) w celu uniknięcia generowania dłuższego transkryptu.

Polimeraza RNA T7 (T7 RNAP)

Zwiąż się z promotorem T7 i wygeneruj specyficzny transkrypt RNA; Odgrywają kluczową rolę podczas reakcji transkryptu in vitro (IVT).

Enzym zamykający wirusa krowianki

Dodaj struktury Cap do końców 5' mRNA IVT.

Pirofosfataza nieorganiczna (iPPaza)

Zapobiegaj pirofosforanowi podczas reakcji IVT.

Inhibitor RNazy, rekombinowany

Hamuje aktywność RNazy podczas reakcji IVT.

DNaza I

Usuń szablon DNA.

Enzym do produkcji circRNA, wolny od RNaz

RNaza R

Trawij liniowy RNA i wzbogacaj kolisty RNA.

Koniugacja glikanu za pośrednictwem enzymów

Peptydo-N-glikozydaza (PNGaza F)

Rozszczepia wiązanie amidowe pomiędzy pierwszym sacharydem GlcNAc i łańcuchem bocznym Asn297L; Uwolnij glikany z przeciwciał IgG.

Transglutaminaza bakteryjna (BTG)

Koniuguj ładunki specyficzne dla danego miejsca, aby wygenerować ADC.

Sortuj A

Katalizują ligację białek.

β1,4-galaktozydaza

Uwolnij wszystkie końcowe galaktozy i utwórz jednorodną izoformę G0 przeciwciała.

β1,4-galaktozylotransferaza (Gal-T)

Przenieść resztę cukru z chemicznie reaktywną grupą funkcyjną.

α2,6-sialilotransferaza (Sial T)

Włączyć końcowe reszty kwasu sialowego do natywnej struktury glikanu przeciwciała.

Przebudowa glikanów za pośrednictwem enzymów i glikoinżynieria

Endo-N-acetyloglukozaminidaza (ENGaza)

Hydrolizują wiązanie β1,4-glikozydowe pomiędzy GlcNAcβ1–4GlcNAc N-glikanów; Usuń N-glikany z regionu Fc przeciwciał IgG.

Endoglikozydaza S (EndoS)

Glikozylotransferazy (GT)

Przenieść N-glikan oksazolinę do defukozylowanych IgG.

Pozostałe

Enzymy wytwarzane przez szczep drobnoustrojów

Dostosowana potrzeba

Rekombinowany enzym jako odczynnik
Proteazy do usuwania znaczników

Znaczniki fuzyjne są często stosowane w celu poprawy rozpuszczalności i stabilności rekombinowanych białek będących przedmiotem zainteresowania i ułatwienia ich oczyszczania. Powszechnie stosowane znaczniki obejmują znacznik His, białko wiążące maltozę (MBP), s-transferazę glutationową (GST) itp.

Zwykle pomiędzy znacznikiem fuzyjnym a sekwencją białka docelowego dodaje się sekwencję łącznika w celu usunięcia znacznika. Usunięcie znaczników fuzyjnych wymaga proteaz specyficznych dla miejsca, takich jak enterokinaza (EK), trombina, proteaza wirusa wżerania tytoniu (TEVp), proteaza ludzkiego rinowirusa 3C (HRV3C), proteaza białka modyfikującego małą ubikwitynę (SUMO), wirus plamistości żył tytoniu ( TVMV) i karboksypeptydazę A/B (CPA/CPB).

Typ

Enzymy

Miejsce uznania

Endoproteazy do usuwania znaczników

Enterokinaza (EK), enteropeptydaza

DDDDK↓

trombina

LVPR↓GS

proteaza TEV

ENLYFQ↓G

Proteaza HRV3C

LEVLFQ↓GP

Proteaza SUMO

Struktura trzeciorzędowa SUMO

Proteaza TVMV

ETVRFQG↓S

Egzoproteazy do usuwania znaczników

Karboksypeptydaza A (CPA)

Aminokwasy C-końcowe, z wyjątkiem Pro, Lys i Arg

Karboksypeptydaza B (CPB)

C-końcowy Lys i Arg

Inne proteazy, nukleazy i amidazy

Zastosowanie

Enzymy

Funkcjonować

Inne proteazy

Proteaza K

Proteaza serynowa trawiąca białka poprzez hydrolizę wiązań peptydowych.

IdeS, proteaza IgG

Enzymy degradujące IgG (Ides), które rozszczepiają w określonym miejscu immunoglobuliny G (IgG), tworząc fragmenty Fab i Fc

Proteaza IgA1

Enzym proteolityczny przecinający określone miejsce w sekwencji regionu zawiasowego ludzkiej immunoglobuliny A1 (IgA1).

Nukleaza

Nukleaza

Rozszczepia kwasy nukleinowe (DNA lub RNA) poprzez hydrolizę wiązań fosfodiestrowych.

Ogranicz enzym

Endonukleaza rozcinająca DNA w określonych miejscach lub w ich pobliżu.

Amidaza

PNGaza F

Rozszczepia najbardziej wewnętrzne reszty N-acetyloglukozaminy (GlcNAc) i asparaginy w oligosacharydach o wysokiej zawartości mannozy, hybrydowych i złożonych.

Yaohai Bio-Pharma oferuje kompleksowe rozwiązanie CDMO dla rekombinowanych enzymów
Numer referencyjny:

[1] Hennigan JN, Lynch MD. Przeszłość, teraźniejszość i przyszłość terapii enzymatycznych. Narkotyki Discovery dzisiaj. 2022 stycznia; 27(1):117-133. doi: 10.1016/j.drudis.2021.09.004.

Uzyskaj bezpłatną wycenę

Skontaktuj się z nami