Substancje lecznicze biologiczne to złożone duże cząsteczki, szczególnie wrażliwe na czynniki środowiskowe: temperaturę, utlenianie, światło, zawartość jonową i cięcie. Kluczowe jest przeprowadzenie badań stabilności zarówno substancji leczniczej, jak i wyrobu lekowego w warunkach zaplanowanego przechowywania, przyspieszonych warunkach oraz warunkach wymuszonej degradacji. Dane dotyczące stabilności są zwykle wykorzystywane do wsparcia okresu przydatności, daty wygaśnięcia i warunków przechowywania.
Zgodnie z wytycznymi ICH Q5C, Yaohai Bio-Pharma oferuje usługi badań stabilności dla białek, peptydów, plazmidów i mRNA, obejmujące badania długoterminowej stabilności, przyspieszone badania stabilności oraz badania wymuszonej degradacji. Ponadto dysponujemy wszelkimi niezbędnymi możliwościami do przechowywania próbek i analizy Krytycznych Atrybutów Jakości (CQA) w celu zebrania danych dotyczących stabilności.
Wymagania prawne dotyczące badań stabilności
Zgodnie z wytycznymi ICH Q5C, „Należy opracować odpowiednie dane dotyczące stabilności dla produktu biotechnologicznego/biologicznego, ponieważ wiele warunków zewnętrznych może wpływać na moc, czystość i jakość produktu. Zaleca się również przeprowadzenie badań dla substancji lekowej oraz gotowego leku w warunkach przyspieszonych i stresujących.
Badania stabilności w czasie rzeczywistym (długoterminowe)
W badaniach stabilności w czasie rzeczywistym (długoterminowych) substancja lekowa lub gotowy lek jest przechowywany w zaplanowanych warunkach magazynowania i monitorowany do momentu, gdy cechy biologiczne zmienią się poza dopuszczalnymi granicami. W wyniku badań długoterminowych można ustalić okres przydatności, datę ważności, warunki przechowywania oraz interwały próbkowania/testowania.
Tabela 1. Częstotliwość badań w badaniach długoterminowej stabilności biologicznych produktów przed rejestracją
| Okres trwałości |
Interwały badań |
Punkty czasowe |
| 1 rok lub mniej |
Miesięcznie przez pierwsze 3 miesiące;
Co 3 miesiące później
|
W miesiącach 0, 1, 2, 3, 6, 9 i 12 |
| Więcej niż 1 rok |
Co 3 miesiące w pierwszym roku;
Co 6 miesięcy w drugim roku;
Rocznie później
|
W miesiącach 0, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 36 oraz rocznie później |
Przyspieszone badania stabilności
Zalecana temperatura przechowywania biopreparatów do wstrzykiwań jest zazwyczaj między 2 a 8℃. Przyspieszone badania stabilności przeprowadza się w krótszym czasie pod warunkami przyspieszonymi, takimi jak wysoka temperatura. Dane dotyczące stabilności są uznawane za pomocnicze informacje dotyczące stabilności produktu i szeroko stosowane w określaniu daty przydatności oraz w opracowywaniu formuły produktu.
Tabela 2. Przykłady przyspieszonych badań stabilności
| Badania stabilności |
Warunki przyspieszone |
Punkty poboru próbek |
| Przyspieszone badania stabilności |
wyższa temperatura
wilgotność względna
|
W miesiącach 0, 1, 2, 3, 6 |
Studia wymuszonej degradacji
Celem badań wymuszonej degradacji jest zebranie informacji o stabilności w warunkach stresu, takich jak wysokie temperatury, wilgotność, światło, utlenianie, cykl zamrażania-odmrożeniowego lub stres mechaniczny (trząsienie, cięcie). Badania wymuszonej degradacji substancji czynnej lub leku w ekstremalnych warunkach mogą pomóc w rozpoznaniu kluczowych czynników/parametrów prowadzących do degradacji biologicznych. Te dane są przydatne do oceny odporności formuły i procesu produkcyjnego.
Tabela 3. Przykłady badań wymuszonej degradacji
| Naprężenie |
Warunki stresu |
Czas trwania |
| Temperatura |
Wysoka temperatura (np., 25℃, 30℃, 37℃, 40℃) |
Dni-miesiące |
| Wilgotność |
Wilgotność względna (0~100%) |
Dni-miesiące |
| Światło |
Minimum 1,2 miliona lx h i 200 W h/m2 |
Kilka dni |
| Zamrażanie-odmrażanie |
zamrażanie–odmrażanie (od -20℃, -80℃ do 15℃) |
1~5 cykli |
| Wstrząsanie, mieszanie |
50~500 obr./min |
Godziny-dni |
Metody analityczne wspierające badania stabilności
| Kluczowe Atrybuty Jakości (CQAs) |
Metody analityczne |
| Całkowita zawartość białek |
UV, BCA, Bradford, Lowry |
| Widoczne cząstki |
Inspekcja wizualna |
| Agregacja, fragmenty |
Dynamiczna dyfuzja światła Chromatografia rozdzielcza (SEC) HPLC/UPLC, Elektroforeza kapilarna CE (CGE, CZE, cIEF/iCIEF), SDS-PAGE w warunkach nieredukcyjnych |
| Mapowanie i sekwencjonowanie peptydów |
LC-MS/MS |
| Wiązania disulfanowe |
LC-MS/MS |
| MPT (oksydacja, izomerizacja, deamidacja, glikozylacja) |
LC-MS/MS |
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
