DNA plazmidowe, jako w vitro szablon na transkrypcję (IVT), jest ważnym surowcem dla produkcji mRNA. Wysoka wydajność, wysokie wyczyszczenie i wysokie odzyskiwanie DNA plazmidowego są główne cel podczas rozwoju procesu plazmidowego.
Yaohai Bio-Pharma oferuje kompleksowe rozwiązanie dla rozwoju plazmidów, w tym rozwój procesów górnego (fermentacja) i dolnego (oczyszczanie) strumienia, charakteryzację procesu i walidację procesu. Mamy szeroki doświadczenie w poprawie wydajności plazmidów i ich izolowaniu z złożonych macierzy przez rozwijanie i optymalizację procesów fermentacji, oczyszczania i usuwania nieczystości.
Podstawowy bioproces produkcyjny dla plazmidów obejmuje: Escherichia coli (E. coli) fermentację, zbieranie komórek i alkalijną lizątę,澄清, koncentrację, trzyetapowy proces chromatograficzny (zbiór, pośrednie oczyszczanie i polerowanie), oraz koncentrację.
Szczegóły usług | Jednostki operacyjne | Parametry |
E. coli fermentacja |
Flaszka do mieszania | Skład medium, antybiotyk, objętość nasiennika, temperatura wzrostu oraz inne. |
Fermenter (7 L) |
Antybiotyk, objętość nasiennika, temperatura wzrostu, pH, tlen rozpuszczony (DO), tryb karmienia (np. fed-batch), medium karmienia, czas fermentacji oraz inne. |
|
Zbieranie komórek | Mikrofiltracja | Standard E. coli proces zbierania |
Lizys komórkowy | Przywrócenie komórek, lizys alkaliczny, neutralizacja | Stosunek alkaliczności, czas lizysu |
Clarification | Filtrowanie | Początkowa filtracja, 20 µm i filtr 5 µm (preferowany) |
Koncentracja | Ultrafiltracja, filtracja przepływem stycznym | Rozmiar porów (lub NMWC), Ciśnienie transmembranowe (TMP), Flux, stosunek objętości filtraisu do powierzchni membrany |
Chromatografia w trzech etapach | Chromatografia rozdziału według wielkości (SEC) lub chromatografia filtryczna (GFC) | Długość i średnica kolumny, skład bufora, objętość iniekcji, skład faz ruchomych (adsorpcja i desorpcja), pH, prędkość przepływu, warunki równowagi, wiązania, płukania i elucji. |
Chromatografia afiniczna (AF) | ||
Chromatografia wymiany anionowej (AEX) | ||
Koncentracja | Ultrafiltracja, filtracja przepływem stycznym | Rozmiar porów (lub NMWC), Ciśnienie transmembranowe (TMP), Flux, stosunek objętości filtraisu do powierzchni membrany |
Więcej rozwiązań procesowych do oczyszczania biologicznych |