Znaczenie wyboru odmian
Wybór odpowiednich gospodarzy jest konieczny w ramach rozwoju CMC biopreparatów, co determinuje jakość i spójność produktu oraz procesu produkcyjnego. bezpośredni cel wyboru gospodarza to dostarczenie kandydującego podstawowego banku komórek (PCB) z wysokim poziomem ekspresji i wysoką stabilnością zarówno pod względem stabilności przechodzenia, jak i stabilności przechowywania. Wybór odpowiedniego gospodarza jest konieczny z dwóch głównych powodów:
- Po pierwsze, wybór mikrobiologicznego gospodarza o wysokim poziomie ekspresji. Istnieje wiele dostępnych komercyjnie odmian, które są wykorzystywane do ekspresji różnych typów białek, takich jak toksyczne białka, rozpuszczalne białka lub bakterialne białka.
- Po drugie, przesiewanie gospodarza z genetyczną stabilnością. Testowanie genetycznej stabilności jest kluczowym elementem przez cały cykl życia produkcyjnego. Zaleca się, aby wysoka stabilność genetyczna została uznana za kolejną kluczową cechę odpowiedniego szczepu.
Słowa kluczowe: wybór szczepu mikrobowego, przesiewanie szczepów mikrobowych, wysokoprzepustowe przesiewanie bakterii lub drożdży, przesiewanie szczepów o wysokim wydajnym produkcji, przesiewanie szczepów o wysokiej stabilności, przesiewanie szczepów genetycznie stabilnych Aplikacja: medycyna ludzka, medycyna weterynaryjna, szczepionki, biologia syntetyczna, rekombinanci wielkich cząsteczek biologicznych, reageny biologiczne
Usługi przesiewania szczepów Yaohai Bio-Pharma
Korzystając z ponad 10-letniego doświadczenia w dziedzinie CDMO w zakresie mikrobiologicznych produktów biologicznych, wspieramy rozwój i produkcję różnych dużych cząsteczek, w tym szczepionek rekombinacyjnych podjednostkowych, cząsteczek podobnych do wirusów (VLP), hormonów (insulin, GLP-1, hormon wzrostu), cytokin (Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), czynników wzrostu (EGF, FGF, NGF), nanociał (Single-domain antibodies/sdAbs), enzymów itp.
Nabiliśmy bogate doświadczenie w wyborze różnych typów wektorów plazmidowych oraz mikrobiologicznych gospodarzy, w tym bakterii Escherichia coli (E. coli), a drożdżami Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Możemy znaleźć najlepszy system ekspresji dla Twoich unikalnych produktów biologicznych.
Zebraliśmy różne mikrobiologiczne gospodarze o jasnych źródłach i standardowych certyfikatach jakości (CoA), w tym E. coli ekspresję bakteryjną i ekspresję drożdżyową.
Szczegóły usług
|
Usługi
|
Szczegóły usług
|
Minimalny czas realizacji/dzień
|
Dostarczane materiały
|
|
Konstrukcja szczepu (E. coli)
|
Transformacja plazmidowa (wielu gospodarzy)
|
5
|
COA komercyjnych gospodarzy Raport konstrukcji szczepu
|
|
Weryfikacja PCR
|
|
Czyszczenie szczepu
|
|
Konzervacja szczepu
|
|
Konstrukcja szczepu (drożdże)
|
Przygotowanie kompetentnych komórek drożdży
|
10
|
|
Linijność plazmidu
|
|
Przekształcenie elektryczne
|
|
Test oporności / niedoboru odżywczego
|
|
Czyszczenie szczepu
|
|
Konzervacja szczepu
|
|
Ekranowanie odpowiedniego gospodarza
|
Wyodrębnianie DNA plazmidowego lub genomowego
|
15-20
|
Proces ekranowania gospodarza COA szczepów inżynieryjnych
|
|
Weryfikacja PCR, trawienie enzymem restrykcyjnym
|
|
Sekwencjonowanie Genów Docelowych
|
|
Ekranowanie gospodarzy o wysokim wyrażaniu
|
|
Ekranowanie gospodarzy o stabilności genetycznej
|
|
Konzervacja szczepu
|
Badanie przypadków
Odpowiedni gospodarz zwiększa poziom ekspresji białka o 2,5 razy.
Jesteśmy zleconymi do rozwijania wysoce produkcyjnych E. coli odmian. I spróbowaliśmy trzy rodzaje komercyjnych E. coli gospodarzy, na podstawie właściwości białka docelowego. Wykazano, że odmiana S1-1 i S1-2 (Rysunek A: Pas 1,2) poprawiła poziom białka do 3,5 razy w porównaniu do początkowej odmiany klienta (Rysunek A: Pas 3).
Ponadto, odmiana S1-1 wykazała wysoką stabilność genetyczną (Rysunek B), a została uznana za odmianę kandydującą do banku podstawowych komórek (PCB).
Charakterystyka naszych usług
Potwierdzone kompetencje w zakresie różnych gospodarzy mikrobiologicznych, np. E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink strain1/2/3/4; S. cerevisiae i H. polymorpha .
Mamy doświadczenie w E. coli sekrecji periplazmatycznej, wyrażaniu się rozpuszczalnym i w postaci ciała inkluzyjnego, jak również we wyrażaniu się drożdży intrakomórkowego lub sekretorycznego. Nie dodajemy antybiotyków lub dodajemy je zgodnie z przepisami regulacyjnymi.
Ustanawiamy platformę wysokoprzepustowego ekranowania, aby filtrować szczepy o wysokiej produkcyjności i stabilności spośród ponad stu kandydujących szczepów.
Zapewnione jest, że proces inżynierii szczepu i filtrowania jest śledzony, zgodnie z dobrym zarządzaniem danymi i dokumentacją.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
