Analiza lokalizacji N-glikozylacji jest kluczowa dla zrozumienia funkcji glikanów. Yaohai Bio-Pharma używa chromatografii ciekłej-maszynowego spektrometru mas (LC-MS) po enzymatycznym odcięciu do analizy lokalizacji N-glikozylacji.
Byliśmy zaangażowani w charakteryzację strukturalną białek różnych dużych cząsteczek, w tym szczepionek rekombinacyjnych, Nanociał, VHH, antyciał pojedynczo-domenowych (sdAbs), fragmentów antyciał, hormonów/peptydów, cytokin, czynników wzrostu (GF), enzymów, kolagenu itp.
Wymagania normatywne dotyczące lokalizacji N-glikozylacji
Zgodnie z wytycznymi ICH Q6B „dla glikoproteínów określana jest zawartość węglowodanów (neutralne cukry, aminokukry i kwas syjany). Ponadto, struktura łańcuchów węglowodanowych, wzorzec oligosacharydowy (profil antenowy) oraz miejsca glikozylacji łańcucha polipeptydowego są analizowane w jak największym zakresie.
Metoda analityczna
Analizy |
Metody |
Miejsce N-glikozylacji |
Chromatografia ciekła-Masa Spektrometria (LC-MS) po enzymatycznym odcięciu |
Procedury
1. Rozkład białka enzymatycznie za pomocą trypsyny lub innego proteazy
2. Odseparuj fragmenty glikopeptydy
3. Potwierdź miejsce N-glikozylacji za pomocą LC-MS
4. Analizuj dane