Yaohai Bio-Pharma oferuje usługi testowania sekwencji N-terminalowych i analizy danych na podstawie chromatografii ciekłej-masz spectrometrii (LC-MS) lub metody degradacji Edmana, które pozwalają określić aminokwasydy w odpowiednich końcach białka interesującego. Modyfikacje N-terminalowe mogą również być analizowane za pomocą LC-MS.
Byliśmy zaangażowani w charakteryzację strukturalną białek różnych dużych cząsteczek, w tym szczepionek rekombinacyjnych, Nanociał, VHH, antyciał pojedynczo-domenowych (sdAbs), fragmentów antyciał, hormonów/peptydów, cytokin, czynników wzrostu (GF), enzymów, kolagenu itp.
Wymagania normatywne dotyczące sekwencjonowania N-terminalowego
Zgodnie z wytycznymi ICH Q6B konieczne jest potwierdzenie sekwencji twojego białka oraz sprawdzenie końców na obecność jakichkolwiek odchyleń.
Metody sekwencjonowania N-terminalowego
Analizy |
Metoda |
Sekwencjonowanie N-końcówki |
Degradacja Edmana, Chromatografia Ciekła-Masz Spectrometria (LC-MS) |
Procedury
LC-MS
1. Fluorescentne oznaczanie N-końca białka
2. Wielokrotne trawienia
3. Analiza chromatografii ciekłej LC-MS / spektrometria mas (MS)
Degradacja Edmana
1. Elektroforeza w gelu z Sodowego Dwunastego Siarczanu (SDS) dla docelowego białka
2. Przeniesienie gela na membrany Poliwiniowych Floranu Dwufluorydowego (PVDF) i barwienie
3. Zidentyfikuj i wytnij pasmo docelowego białka
4. Sekwencjonowanie N-końca metodą Edmana
5. Analiza danych