Przetwarzanie |
Usługa opcjonalna |
Szczegóły usługi |
Okres dostawy (dzień) |
Projektowanie i optymalizacja sekwencji circRNA |
Projektowanie i optymalizacja sekwencji kodujących |
Optymalizacja kodonów CDS |
1 |
Projektowanie i optymalizacja sekwencji niekodujących |
Sekwencja intronów i eksonów, projektowanie i optymalizacja ramion homologicznych i odstępników |
1-2 |
Przygotowanie plazmidu kołowego |
Synteza genów |
Synteza genów (strona trzecia) |
7-10 |
Amplifikacja plazmidu |
Amplifikacja plazmidu |
2 |
Ekstrakcja plazmidu |
Linearyzowane przygotowanie plazmidu |
Linearyzacja i oczyszczanie plazmidów |
Linearyzacja plazmidu |
1 |
Linearyzacja Oczyszczanie DNA |
Transkrypcja i cyklizacja in vitro |
Transkrypcja i cyklizacja in vitro |
Reakcje transkrypcji i cyklizacji in vitro |
1-2 |
Trawienie RNazą R |
Optymalizacja - opcjonalna |
Skład reakcji, optymalizacja czasu |
2-5 |
Oczyszczanie circRNA |
Konwencjonalna metoda oczyszczania |
Wytrącanie chlorku litu |
1 |
Oczyszczanie kulkami magnetycznymi |
1 |
Wysoce czyste oczyszczanie circRNA |
Preparatywna wysokosprawna chromatografia cieczowa (HPLC) |
1-2 |
Wymiana buforów |
Ultrafiltracja |
1 |
circRNA Liofilizacja |
Próbne wypełnienie |
Wypełnienie |
2-3 |
Liofilizacja |
Wstępne zamrażanie |
Suszenie pierwotne (sublimacja) |
Suszenie wtórne (desorpcja) |
Kapsułkowanie circRNA-LNP |
Enkapsulacja LNP |
Wstępna obróbka materiału i cieczy |
2 |
Mieszanie urządzeń mikroprzepływowych |
Wymiana buforów |
Filtracja z przepływem stycznym |
1 |
wysterylizowany |
Sączenie |
Kontrola jakości plazmidowego DNA |
Stężenie/czystość |
Spektrofotometria ultrafioletowa (UV). |
1-2 |
Konformacja plazmidu |
Elektroforeza w żelu agarozowym (AGE) |
Elektroforeza kapilarna (CE) – opcjonalnie |
Identyfikacja plazmidu |
Identyfikacja enzymu restrykcyjnego/WIEK |
Kontrola jakości circRNA |
Stężenie/czystość |
Spektrofotometria ultrafioletowa (UV). |
- |
Czystość |
Elektroforeza w żelu agarozowym (AGE)/E-Gel |
0.5 |
HPLC – opcjonalnie |
1 |
Kontrola jakości circRNA-LNP |
Wydajność kapsułkowania |
Metoda RiboGreena |
1 |
Rozmiar cząsteczki |
Dynamiczne rozpraszanie światła (DLS) |
1 |
Indeks polidyspersyjności |
Dynamiczne rozpraszanie światła (DLS) |
1 |
Potencjał zeta |
Dynamiczne rozpraszanie światła (DLS) |
1 |
Test mocy oparty na komórkach |
Transfekcja komórkowa |
Posiew komórek, transfekcja komórek |
4 |
Wykrywanie białka docelowego |
Obserwacja fluorescencji, Western Blot/ELISA |
1-3 |