Przygotowanie CircRNA wymaga liniowego RNA jako materiału poprzednika (precursora RNA) do cyklowania, gdzie precursor RNA jest zwykle przygotowywany za pomocą liniowego DNA plazmidowego jako szablonu transkrypcyjnego i transkrybowany in vitro z pomocą polimerazy RNA T7.
Wysokiej jakości DNA plazmidowe jest kluczowe dla transkrypcji in vitro (IVT). Na podstawie dojrzałej platformy usługowej w zakresie przygotowywania plazmidów, Yaohai Bio-Pharma może oferować usługę przygotowywania wysokoczystego i standardowego liniowego DNA plazmidowego (pDNA), aby zapewnić integralność produktów IVT.
Szczegóły usług
| Proces |
Opcjonalne Usługi |
Szczegóły usług |
Okres dostawy (dzień roboczy) |
| Przygotowanie plazmidu kołowego |
Synteza genu |
Synteza Genów (zewnętrzna firma) |
7-10 |
| Wzmacnianie Plazmidów |
Wzmacnianie Plazmidów |
2 |
| Ekstrakcja Plazmidów |
| Przygotowanie Plazmidu Liniowego |
Linearizacja i czyszczenie plazmidu |
Linijność plazmidu |
1 |
| Czyszczenie DNA po Liniarizacji |
| Kontrola jakości DNA plazmidowego |
Stężenie i czystość |
Spektrofotometria ultrafioletowa (UV) |
1-2 |
| Konformacja plazmidu |
Elektroforeza w Gelu Agarowym (AGE) |
| Elektroforeza Kapilarna (CE) - Opcjonalnie |
| Identyfikacja Plazmidów |
Identyfikacja enzymu restrykcyjnego/AGE |
Nasze cechy
elastyczny wybór metod liniaryzacji
Optymalizacja metod wydzielania i czystienia DNA w celu osiągnięcia wysokich wskaźników odzysku.
Szczytliwe standardy kontroli procesów, z frekwencją konformacji superwkręconej próbek plazmidowych do badań przekraczającą 80%.
- Dojrzały Proces Platformowy
Usługi przygotowywania i kontroli jakości plazmidów o wysokich standardach i efektywności, aby spełnić potrzeby eksperymentalne.
Badanie przypadków
Przykładowo biorąc produkt Yaohai Bio-Pharma, mCherry circRNA, stosunek superwspółczynników próbek plazmidowych szablonów transkrypcyjnych (klasy badawczej) wynosi ponad 70%, przy stopniu liniaryzacji bliskim 100%.
mCherry circRNA jest przygotowywane z liniaryzowanym plazmidem jako szablonem i transfekowane do komórek 293T. Po 24 godzinach transfekcji wykrywany jest wysoki poziom ekspresji fluorescencji (czerwona fluorescencja), który wzmacnia się po 48 godzinach i nadal można go wykryć w 7. i 14. dniu po transfekcji.
białko mCherry jest stabilnie i wydajnie ekspresowane, a czystość szablonu transkrypcyjnego spełnia wymagania produkcyjne leku circRNA o wysokiej jakości.
Weryfikacja wyrażania się in vitro mCherry circRNA
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
