W procesie transkrypcji in vitro (IVT) mRNA wymagany jest liniowy DNA plazmidowy jako szablon transkrypcji IVT z pomocą polimerazy RNA T7. Wysoko jakości DNA plazmidowego jest kluczowe dla transkrypcji in vitro.
Na podstawie dojrzałej platformy usługi przygotowania plazmidów, Yaohai Bio-Pharma może oferować usługę przygotowania DNA plazmidowego liniowego o wysokiej czystości i wysokich standardach, aby osiągnąć efektywną transkrypcję IVT.
Szczegóły usług
| Proces |
Opcjonalne Usługi |
Szczegóły usług |
Okres dostawy (dzień roboczy) |
| Przygotowanie plazmidu kołowego |
Synteza genu |
Synteza Genów (zewnętrzna firma) |
7-10 |
| Wzmacnianie Plazmidów |
Wzmacnianie Plazmidów |
2 |
| Ekstrakcja Plazmidów |
| Przygotowanie Plazmidu Liniowego |
Linearizacja i czyszczenie plazmidu |
Linijność plazmidu |
1 |
| Czyszczenie DNA po Liniarizacji |
| Kontrola jakości DNA plazmidowego |
Stężenie i czystość |
Spektrofotometria ultrafioletowa (UV) |
1-2 |
| Konformacja plazmidu |
Elektroforeza w Gelu Agarowym (AGE) |
| Elektroforeza Kapilarna (CE) - Opcjonalnie |
| Identyfikacja Plazmidów |
Identyfikacja enzymu restrykcyjnego/AGE |
Nasze cechy
elastyczny wybór metod liniaryzacji
Optymalizacja metod wydzielania i czystienia DNA w celu osiągnięcia wysokich wskaźników odzysku.
Szczytliwe standardy kontroli procesów, z frekwencją konformacji superwkręconej próbek plazmidowych do badań przekraczającą 80%.
- Dojrzały Proces Platformowy
Usługi przygotowywania i kontroli jakości plazmidów o wysokich standardach i efektywności, aby spełnić potrzeby eksperymentalne.
Badanie przypadków
Biorąc pod uwagę katalog Yaohai Bio-Pharma produkt mRNA_luciferase jako przykład, plazmidowy wzorzec szablonu transkrypcji (klasy badawczej) ma stosunek superwkrętu większy niż 90%, a stosunek liniaryzacji bliski 100%, oraz późniejszy stosunek transkrypcji wynoszący do 1:200 (DNA liniaryzowanego plazmidu:mRNA).
MRNA_luciferase uzyskany w wyniku przygotowania liniaryzowanego plazmidu jako szablonu jest transfekowany do komórek 293T, a aktywność reakcji enzymowo-substratowej oceniana jest 24 godziny po transfekcji.
Można wykryć wyraźny silny sygnał aktywności lucyferazy, co oznacza, że białko lucyferazy jest wyrażane efektywnie, sugerując, że czystość szablonu transkrypcji może w pełni zaspokoić wymagania dotyczące przygotowania wysokiej jakości mRNA.
Badanie stosunku superwkręconego plazmidu
Weryfikacja wyrażania się mRNA lucyferazy in vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
