Rekombinowany enzym

Modalność

Rekombinowane enzymy

Rekombinowany enzym do zastosowań leczniczych

Enzymy lecznicze uzyskiwane za pomocą procesów biotechnologicznych są szeroko stosowane w wielu zastosowaniach klinicznych, w tym w terapii zastępczej enzymami, degradacji skumulowanych metabolitów i toksyn, leczeniu raka oraz edycji genomu. Kilka enzymów leczniczych może być produkowana w systemie ekspresji mikrobowej.

Zastosowanie	Enzymy	Materiału	Typowe produkty/kanały
Terapia zastępcza enzymami	Adenozynadeaminaza, ADA	Adenozyna lub deoksyadenozyna	Elapegademase-lvlr (Revcovi)
Terapia zastępcza enzymami	Fenylalanina amoniak liaza, PAL	Fenylalanina	Pegvaliase-pqpz (Palynziq)
Degradacja zgromadzonych metabolitów	Uricase/Urate Oxidase	Kwas moczowy	Peglticase (Krystexxa)Rasburicase (Fasturtec)
	Kolagenaza	Kolagen „blizna”	Kolagenaza clostridium histolyticum (Xiaflex, Qwo, Santyl)
	Ucięte Plazminy	Kolagen, fibronektyna i laminina	Ocriplasmin (Jetrea)
	Ucięty aktywator plasminogenowy tkankowy (tPA)	Plasminogen	Reteplase (Retavase)
	Proteaza IgG	Immunoglobulina G (IgG)	Imlifidase (Idefrix)
	IgA Proteaza	Immunoglobulina A (IgA)	PKU308/AP308IGAN IgA proteaza
Degradacja toksyn	Karboksypeptydaza G2	Metotreksat	Glucarpidase (Voraxaze)
Leczenie raka	Enzym specyficzny dla asparagininy	Asparaginina	Asparaginaza (Elspar)Calaspargase pegol-mknl (Asparlas)
Edycja genomu	Cas9 Nuclease	Cel genetyczny	Exagamglogene autotemcel (Exa-cel, CTX001)

Rekombinacyjny enzym jako materiał

Istnieje kilka enzymów używanych w produkcji długiego RNA kodującego (np. mRNA, saRNA, circRNA), produkcji koniugatów przeciwciała-leku (ADCs) i innych. Enzymy produkowane przez mikroorganizmy są bardziej kosztowefektywne niż te z komórek ssaków, zwłaszcza system wyrażania E. coli.

Zastosowanie	Enzymy	Funkcja
Enzymy do produkcji liniowego RNA, wolne od RNase	Endonukleazy ograniczające	Linearizacja DNA plazmidowego (pDNA), aby uniknąć generowania dłuższego transkryptu.
	Polimeraza RNA T7 (T7 RNAP)	Powiązanie z promotorem T7 i generowanie określonego transkryptu RNA; Odgrywają kluczową rolę podczas reakcji in vitro transcript (IVT).
	Enzym kapekingowy wirusa ospy	Dodawanie struktur Cap do 5′ końców mRNA uzyskanego w procesie IVT.
	Pirofosfataza, organiczna (iPPase)	Uniemożliwiaj pirofosforany podczas reakcji IVT.
	Inhibitor RNazy, rekombinowany	Inhibicja działania RNazy podczas reakcji IVT.
	DNaza I	Usuń szablon DNA.
Enzym do produkcji circRNA, wolny od RNase	Rnase r	Trawi RNA liniową i wzbogaca RNA okrągłą.
Wspomagana enzymami koniugacja glikanów	Peptydowa N-glikozydaza (PNGase F)	Przekrawa amidowe wiązania między pierwszym cukrem GlcNAc a bocznym łańcuchem Asn297; Wydzielanie glikanów z przeciwciał IgG.
	Bakteryjna transglutaminaza (BTG)	Koniuguj ładunki w określonych miejscach, aby wytworzyć ADC.
	Sortaza A	Katalizują ligację białek.
	β1,4-galaktozydaza	Uwalnianie wszystkich terminalowych galaktoz i tworzenie jednorodnego izoformy G0 przeciwciała.
	β1,4-galaktozylotranferaza (Gal-T)	Przenoszenie reszty cukru z chemicznie reaktywną grupą funkcyjną.
	α2,6-sialyltransferaza (Sial T)	Wprowadzanie terminalowych reszt kwasu syjalu do struktury glikany natywnej przeciwciała.
Remodelowanie glikanów mediatycznych enzymowo i glykoingenieria	Endo-N-etyloglukozaminidaza (ENGase)	Hydrolizuj wiązania β1,4-glikozydowe między GlcNAcβ1–4GlcNAc w N-glikanach; Usuń N-związane glikany w regionie Fc przeciwciał IgG.
	Endoglikozydaza S (EndoS)
	Glikozyltransferazy (GTs)	Przenoszą N-glikany oksazolinowe na defukosylowane IgG.
Inni	Enzymy produkowane przez szczep mikrobowy	Dostosowany potrzeb

Rekombinacyjny enzym jako reagent

Proteazy usuwające tagi

Tagi fuzji są często stosowane, aby poprawić rozpuszczalność i stabilność interesujących rekombinacyjnych białek oraz ułatwić ich oczyszczanie. Powszechnie używane tagi obejmują His-tag, białko wiążące maltozę (MBP), glutationowo-transferazę (GST) itp.

Zwykle dodaje się sekwencję łączącego peptydu między tagiem a sekwencją białka docelowego w celu usunięcia taga. Usuwanie tagów fuzji wymaga proteaz o określonym miejscu rozpoznawania, takich jak enterokinaza (EK), trombin, proteaza wirusa tytoniowego (TEVp), proteaza wirusa ludzkiego rynowirusu 3C (HRV3C), proteaza białka SUMO (SUMO), proteaza wirusa tytoniowego plamieniotańca (TVMV) oraz karboksypektydaza A/B (CPA/CPB).

Typ	Enzymy	Miejsce rozpoznawania
Endoproteazy usuwające tagi	Enterokinaza (EK), enteropeptydaza	DDDDK↓
	trombie	LVPR↓GS
	Proteaza TEV	ENLYFQ↓G
	Proteaza HRV3C	LEVLFQ↓GP
	Proteaza SUMO	Trzeciastopniowa struktura SUMO
	Proteaza TVMV	ETVRFQG↓S
Eksoenzymy usuwające tagi	Karboksypeptydaza A (CPA)	Aminokwasy na końcu łańcucha C, z wyjątkiem Pro, Lys i Arg
Eksoenzymy usuwające tagi	Karboksypeptydaza B (CPB)	Lys i Arg na końcu łańcucha C

Inne proteazy, nukleazy i amydazy

Zastosowanie	Enzymy	Funkcja
Inne proteazy	Proteaza K	Serinowa proteaza, która trawi białka poprzez hydrolizę wiązań peptydowych.
	IdeS, proteaza IgG	Enzymy degradujące IgG (Ides), które rozcinają w określonym miejscu immunoglobuliny G (IgG), tworząc fragmenty Fab i Fc.
	Proteaza IgA1	Enzym proteolityczny, który rozciña w określonym miejscu sekwencji regionu zawiasowego ludzkiego immunoglobuliny A1 (IgA1).
Nuklease	Nuklease	Rozcinają kwas nukleinowy (DNA lub RNA) poprzez hydrolizę wiązań fosfodiesterowych.
Nuklease	Restrykcyjny enzym	Endonuclease, która rozcinają DNA w lub blisko określonych miejsc.
Amidaza	PNGase F	Odcięcie między wewnętrzną N-acetyloglukozaminą (GlcNAc) a resztami asparaginy w oligosacharydach o wysokiej mannazie, hybrydowych i złożonych.

Yaohai Bio-Pharma Oferta Kompleksowego Rozwiązania CDMO dla Enzymów Recombinacyjnych

Źródło:

[1] Hennigan JN, Lynch MD. Przeszłość, teraźniejszość i przyszłość terapii opartych na enzymach. Drug Discov Today. 2022 Jan;27(1):117-133. doi: 10.1016/j.drudis.2021.09.004.

Wszystkie kategorie

Modalność

Rekombinowane enzymy

Rekombinowany enzym do zastosowań leczniczych

Rekombinacyjny enzym jako materiał

Rekombinacyjny enzym jako reagent

Proteazy usuwające tagi

Inne proteazy, nukleazy i amydazy

Yaohai Bio-Pharma Oferta Kompleksowego Rozwiązania CDMO dla Enzymów Recombinacyjnych

Źródło:

Mikrobiologiczne CDMO

Szybkie linki

Skontaktuj się z nami

Get in touch