Terapeutiskā izmantošana rekombinētajam ēnzam
Terapeutiskie ēnzi, kas iegūti ar biotehnoloģijas procesiem, tiek plaši izmantoti dažādos kliniskajos pielietojumos, tostarp ēnzu aizvietošanas terapijā, sagatavoto metabolītu un toksīnu sadalīšanā, rakanceres ārstēšanā un genomu rediģēšanā. Daži terapeutiskie ēnzi var tikt ražoti mikrobiālajā izpausmes sistēmā.
Rekombinants enzīms kā materiāls
Produkcijai, kas saistīta ar garu kodējošo RNA (piem., mRNA, saRNA, circRNA), antikorpju un medicīnas savienojumu (ADC) ražošanu, tiek izmantoti vairāki enzīmi. Mikrobiāli ražotie enzīmi ir ekonomiskāki nekā tos, kas iegūti no siltkrūtīgo šūnu, īpaši E. coli izteiksmes sistēmā.
|
PIEKTAIS
|
Ēnzi
|
Funkcija
|
|
Enzīmi lineāras RNA ražošanai, brīvi no RNazēm
|
Restrikcijas endonukleāzi
|
Plazmidu DNA (pDNA) lineārizācija, lai novērstu garāku transkripta veidošanos.
|
|
T7 RNA polimerāze (T7 RNAP)
|
Saistās ar T7 promotoru un ģenerē specifiskus RNA transkriptus; Atspēlē galveno lomu in vitro transkripcijas (IVT) reakcijā.
|
|
Vaksīnijas cappējošais enzīms
|
Pievieno cap struktūru IVT mRNA 5′ galam.
|
|
Pirofosfatāze, neorganiskā (iPPase)
|
Novērst pirofosfātu laikā IVT reakcijai.
|
|
RNase inhibītors, rekombinants
|
Inhibēt RNase aktivitāti laikā IVT reakcijai.
|
|
DNase I
|
Noņemt DNS šablonu.
|
|
Enzīms circRNA ražošanai, brīvs no RNase
|
RNase R
|
Deglint lineāro RNA un apmierināt cirkulāro RNA.
|
|
Enzīma mediētais glikānu savienojums
|
Peptīda-N-glikozidāze (PNGase F)
|
Atdalās amīda saite starp pirmo sakarīdu GlcNAc un Asn297 sānu virsmu; Atbrīvo glikānus no IgG antikūrēm.
|
|
Baktēriālā transglutamināze (BTG)
|
Konjugēt krājumus vietēji specifikā veidā, lai radītu ADC.
|
|
Sorteza A
|
Katalizēt proteīnu savienojumu.
|
|
β1,4-galaktosidaze
|
Atbrīvo visas terminālās galaktosas un veido homogēnu G0 izomoru no antikūres.
|
|
β1,4-galaktosiltranzferaze (Gal-T)
|
Pārvietot cukura atmiņu ar ķīmiski reaktīvu funkcionālo grupu.
|
|
α2,6-siālitransferaze (Sial T)
|
Iekļaut terminālos siālīna acidu atmiņas dzimtajā glikānu struktūrā antikorpuss.
|
|
Enzīma medejas glikānu pārrakstīšana un glikoinženierija
|
Endo-N-asetilglukozaminidāze (ENGase)
|
Hidrolizēt β1,4-glikozīdisko saiti starp GlcNAcβ1–4GlcNAc no N-glikāniem; Noņemt N-saistītos glikānus IgG antikorpu Fc reģionā.
|
|
Endoglukoziđaze S (EndoS)
|
|
|
Glikozīltransferāzes (GTs)
|
Pārvietot N-glikānu oksozolinu uz defucosinātiem IgGs.
|
|
Citi
|
Enzīmi, ko ražo mikrobioloģiskais stiebris
|
Pielāgotais vajadzības
|
Rekombinants enzīms kā reagens
Tagaņu noņemšanas proteāzi
Fusiona tagi bieži tiek izmantoti, lai uzlabotu interešu proteinu risināmību un stabilitāti, kā arī vienkāršotu to tīrīšanu. Bieži izmantotie tagi ieskaita His-tagu, maltēzebindešanas oliecību (MBP), glutatijona-S-transportētāju (GST) utt.
Parasti starp fusiona tagu un mērķa proteinu secību tiek pievienots saites fragments, lai noņemtu tagu. Fusiona tagu noņemšana prasa vietēji specifiskām proteāzēm, piemēram, enterokinēzei (EK), trombinam, tabakas etiņa virusa proteāzei (TEVp), cilvēka rīnusa virusa proteāzei 3C (HRV3C), mazajai ubiquitīnas modifikācijas oliecībai (SUMO) proteāzei, tabakas vēdera mazgājuma virusa (TVMV) proteāzei un karboksipeptidāzei A/B (CPA/CPB).
|
Tips
|
Ēnzi
|
Atzīšanas vieta
|
|
Tagaņu noņemšanas iekšējās oliecības
|
Enterokinēze (EK), enteropeptidaze
|
DDDDK↓
|
|
trombins
|
LVPR↓GS
|
|
TEV proteāze
|
ENLYFQ↓G
|
|
HRV3C proteāze
|
LEVLFQ↓GP
|
|
SUMO proteāze
|
SUMO terciārā struktūra
|
|
TVMV proteāze
|
ETVRFQG↓S
|
|
Žīmesņu noņemšanas eksoproteāzes
|
Karboksipeptidāze A (CPA)
|
C-termiņa aminokisi, izņemot Pro, Lys un Arg
|
|
Karboxipeptidāze B (CPB)
|
C-termiņa Līzī un Arginīns
|
Citas proteīzu, nukleazu un amidasu katalizators
|
PIEKTAIS
|
Ēnzi
|
Funkcija
|
|
Citi proteīzu katalizatori
|
Proteīzu K
|
Sērijas proteīzu katalizators, kas sagriež olbaltumvielas, hidrolizējot peptīdu saites.
|
|
IdeS, IgG proteīzu katalizators
|
IgG degradējošie enzīmi (Ides), kas sagriež konkrētā vietā imunoglobulīnu G (IgG), ražojot Fab un Fc fragmentus
|
|
IgA1 proteīzu katalizators
|
Proteolītisks enzīms, kas sagriež konkrētu vietu cilvēka imunoglobulīna A1 (IgA1) saspringuma reģiona secībā.
|
|
Nukleāze
|
Nukleāze
|
Sadarbojas nukleīnās skābes (DNA vai RNA) hidrolizējot fosfodiestera saites.
|
|
Restriktīvais enzīms
|
Endonukleāze, kas sadarbojas ar DNA tuvumā vai pie noteiktiem vietiem.
|
|
Amidaze
|
PNGase F
|
Sadarbojas starp iekšējo N-asetilglukozaminu (GlcNAc) un asparagīna šķiedrām augstā manosa, hibrīda un kompleksā oligosacbāridešu.
|
Yaohai Bio-Pharma piedāvā kopēju CDMO risinājumu rekombinantu enzīmu gadījumā
Atsauce:
[1] Hennigan JN, Lynch MD. Enzīmbazēto terapiju pagātne, tagadne un nākotne. Drug Discov Today. 2022. gada janvāris;27(1):117-133. doi: 10.1016/j.drudis.2021.09.004.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
