Deformācijas skrīninga nozīme
Bioloģisko CMC izstrādei nepieciešama piemērotu saimniekorganismu skrīnings, kas nosaka produkta un ražošanas procesa kvalitāti un konsekvenci. Saimnieka skrīninga tiešais mērķis ir nodrošināt primāro šūnu banku (PCB) ar augstu ekspresijas līmeni un augstu stabilitāti gan caurlaides stabilitātes, gan uzglabāšanas stabilitātes ziņā. Piemērota saimnieka pārbaude ir nepieciešama divu galveno iemeslu dēļ:
- Pirmkārt, lai atlasītu mikrobu saimniekorganismu ar augstu ekspresijas līmeni. Ir vairāki komerciāli pieejami celmi, kurus izmanto, lai ekspresētu dažāda veida olbaltumvielas, piemēram, toksiskas olbaltumvielas, šķīstošās olbaltumvielas vai eikariotu proteīnus.
- Otrkārt, pārbaudīt saimniekorganismu ar ģenētisko stabilitāti. Ģenētiskās stabilitātes pārbaude ir galvenais punkts visā ražošanas dzīves ciklā. Tiek ierosināts, ka augsta ģenētiskā stabilitāte tiek atzīta par citu piemērotu celmu galveno īpašību.
Atslēgvārdi: mikrobu celmu atlase, mikrobu celmu skrīnings, augstas caurlaidības baktēriju vai rauga skrīnings, augstas ražošanas celmu skrīnings, ļoti stabila celma skrīnings, ģenētiski stabila celma skrīnings Pielietojums: cilvēku medicīna, dzīvnieku medicīna, vakcīna, sintētiskā bioloģija, rekombinantā lielmolekula bioloģiskie līdzekļi, bioloģiskais reaģents
Uzņēmuma Yaohai Bio-Pharma celmu skrīninga pakalpojumi
Pateicoties vairāk nekā 10 gadu CDMO pieredzei mikrobu bioloģiskajā jomā, mēs atbalstām dažādu lielu molekulu izstrādi un ražošanu, tostarp rekombinantās apakšvienības vakcīnas, vīrusiem līdzīgas daļiņas (VLP), hormonus (insulīnu, GLP-1, augšanas hormonu), citokīnus ( Interleikīns-2/IL-2, IL-15, IL-21), augšanas faktori (EGF, FGF, NGF), nanoķermeņi/viena domēna antivielas (sdAb), fermenti utt.
Mēs esam uzkrājuši bagātīgu pieredzi dažādu veidu plazmīdu vektoru un mikrobu saimnieku, tostarp baktēriju, atlasē Escherichia coli (E. coli), un raugs Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Mēs varam atrast labāko izteiksmes sistēmu jūsu unikālajām bioloģiskajām vielām.
Mēs savācām dažādus mikrobu saimniekus ar skaidriem avotiem un standarta CoA, tostarp E.coli izteiksme un rauga izteiksme.
Informācija par pakalpojumu
|
Pakalpojumi
|
Informācija par pakalpojumu
|
Minimālais laika grafiks/diena
|
Piegādes
|
|
Celma konstrukcija (E. coli)
|
Plazmīdu transformācija (vairāki saimnieki)
|
5
|
Komerciālo saimnieku COA Celma būvniecības ziņojums
|
|
PCR pārbaude
|
|
Celma attīrīšana
|
|
Celma saglabāšana
|
|
Celma konstrukcija (raugs)
|
Kompetentu rauga šūnu sagatavošana
|
10
|
|
Plazmīdu linearizācija
|
|
Elektropārveidošana
|
|
Izturības/uztura deficīta skrīnings
|
|
Celma attīrīšana
|
|
Celma saglabāšana
|
|
Piemērota saimnieka pārbaude
|
Plazmīdu vai genoma DNS ekstrakcija
|
15-20
|
Saimnieka skrīninga process Inženierizētu celmu COA
|
|
PCR pārbaude, restrikcijas enzīmu gremošana
|
|
Mērķa gēnu sekvencēšana
|
|
Augstas ekspresijas saimnieku skrīnings
|
|
Saimnieku skrīnings ar ģenētisko stabilitāti
|
|
Celma saglabāšana
|
Gadījuma izpēte
Piemērots saimnieks uzlabo proteīna ekspresijas līmeni 2.5 reizes.
Mums ir uzdots izstrādāt augstas ražošanas E. coli celms. Un mēs izmēģinājām trīs veidu reklāmas E. coli saimniekiem, pamatojoties uz mērķa proteīna īpašībām. Ir pierādīts, ka celms S1-1 un S1-2 (A attēls: 1,2., 3.5. josla) uzlaboja proteīna līmeni līdz 3 reizēm nekā klienta sākotnējais celms (A attēls: XNUMX. josla).
Turklāt celmam S1-1 bija augsta ģenētiskā stabilitāte (B attēls), un tas tika atzīts par primāro šūnu banku veidošanas (PCB) kandidātcelmu.
Mūsu pakalpojumu iespējas
Pierādītas zināšanas ar dažādiem mikrobu saimniekiem, piemēram, E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink celms 1/2/3/4; S.cerevisiae un H. polymorpha.
Mēs esam pieredzējuši ar E. coli periplazmatiskā sekrēcija, šķīstošā un ieslēguma ķermeņa ekspresija, kā arī rauga intracelulāra vai sekrēta ekspresija. Mēs nepievienojam antibiotikas vai pievienojam antibiotikas saskaņā ar normatīvajiem norādījumiem.
Mēs izveidojam augstas caurlaidspējas skrīninga platformu, lai pārbaudītu augstas ražošanas un stabilus celmus no vairāk nekā simts kandidātu celmiem.
Labas datu un ierakstu pārvaldības ietvaros tiek nodrošināts, ka deformācijas inženierijas un skrīninga process ir izsekojams.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NĒ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
