Celmu inženierijas nozīme
Celmu inženierijas mērķis ir padarīt izteiksmi saimnieku ar cerību īpašībām, kas ir nepieciešamas bioloģisko CMC attīstībai un nosaka produkta un ražošanas procesa kvalitāti un konsekvenci.
Atslēgvārdi: celmu gēnu inženierija un skrīnings, proteīnu ekspresijas celmu konstrukcija, mikrobu šūnu inženierija, baktēriju celmu inženierija, rauga celmu inženierija, prokariotu mikroorganismu uzbūve, eikariotu mikroorganismu inženierija, inženierijas celms
Pielietojums: cilvēku medicīna, dzīvnieku medicīna, vakcīna, sintētiskā bioloģija, rekombinantas lielas molekulas bioloģiskās vielas, bioloģiskais reaģents
Uzņēmuma Yaohai Bio-Pharma celmu inženierijas pakalpojumi
Izmantojot vairāk nekā 10 gadu CDMO pieredzi mikrobu bioloģiskajā jomā, mēs esam uzkrājuši bagātīgu pieredzi dažādu plazmīdu vektoru un mikrobu saimnieku (baktērijas, rauga) veidošanā un atlasē. Mēs varam atrast labāko izteiksmes sistēmu jūsu unikālajām bioloģiskajām vielām.
Mēs savācām dažādus mikrobu saimniekus ar skaidriem avotiem un standarta CoA, tostarp
Baktērijas: Escherichia coli (E. coli)
Raugs: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)
Informācija par pakalpojumu
Pakalpojumi
|
Informācija par pakalpojumu
|
Minimālais laika grafiks/diena
|
Piegādes
|
Celmu inženierija
|
Gēnu izslēgšana jeb gēna dzēšana
|
TBD
|
Celmu inženierijas ziņojums
|
Gēnu knock-in jeb gēna ievietošana
|
Celma konstrukcija (E. coli)
|
Plazmīdu transformācija (vairāki saimnieki)
|
5
|
Komerciālo saimnieku COA,
Celma konstrukcijas ziņojums
|
PCR pārbaude
|
Celma attīrīšana
|
Celma saglabāšana
|
Celma konstrukcija (raugs)
|
Kompetentu rauga šūnu sagatavošana
|
10
|
Plazmīdu linearizācija
|
Elektropārveidošana
|
Izturības/uztura deficīta skrīnings
|
Celma attīrīšana
|
Celma saglabāšana
|
Piemērota saimnieka pārbaude
|
Plazmīdu vai genoma DNS ekstrakcija
|
15-20
|
Saimnieka skrīninga process,
Inženierijas celmu testēšanas ziņojums
|
PCR pārbaude, restrikcijas enzīmu gremošana
|
Mērķa gēnu sekvencēšana
|
Augstas ekspresijas saimnieku skrīnings
|
Saimnieku skrīnings ar ģenētisko stabilitāti
|
Celma saglabāšana
|
Gadījuma izpēte
Inženierijas Hansenula polymorpha uzlaboja HPV L1 VLP ekspresijas ražu.
Mēs esam izveidojuši raugu Hansenula polymorpha (H. polymorpha) inženierijas un skrīninga platforma rekombinanto proteīnu/peptīdu ekspresijai. Pirmkārt, mēs ģenerējām H. polymorpha proteāzes deficīta celmus ar mērķtiecīgu gēnu dzēšanu. Otrkārt, vektors, kas satur HPV L1 gēnu, tika pārveidots par kompetento H. polymorpha šūna. Visbeidzot, mēs pārbaudām labāko klonu no simtiem iespēju ar ģenētiski stabilu un augstas ražošanas īpašībām.
Mūsu pakalpojumu iespējas
Mēs esam pierādījuši zināšanas par dažādiem mikrobu saimniekiem, piemēram, Escherichia coli (E. coli) DH5α, TOP10, Trans10, BL21; Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink celms 1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) un Hansenula polymorpha (H. polymorpha).
Mēs esam pieredzējuši ar E. coli periplazmatiskā sekrēcija, šķīstošā un ieslēguma ķermeņa ekspresija, kā arī rauga intracelulāra vai sekrēta ekspresija.
Mēs nepievienojam antibiotikas vai pievienojam antibiotikas saskaņā ar normatīvajiem norādījumiem.
Mēs izveidojam augstas caurlaidspējas skrīninga platformu, lai pārbaudītu augstas ražošanas un stabilus celmus no vairāk nekā simts kandidātu celmiem.
Mēs pārliecināmies, ka celmu izstrādes un skrīninga process ir izsekojams saskaņā ar labu datu un ierakstu pārvaldību.