Rekombinātie proteīni bieži sastopamas ar atklātu aminoskābju puses virsmas oksidāciju, piemēram, triptofānu (Trp) un metionīnu (Met), kas maina proteīnu fizikālās un ķīmiskās īpašības. Šīs izmaiņas varētu savukārt ietekmēt bioloģiskās funkcijas nozieņu proteīniem, piemēram, saistīšanās zaudējumi, enzīma aktivitātes samazināšana, neatgaidīti strauja izvadīšana. Proteīni ir svarīgi mērķi oksidatīvajiem reakcijām, jo tie reaģē ātri ar oksidantiem un ir daudz kārtēji šūnās, ekstracelulārajā tīkla un organismā.
Tādējādi, proteīnu oksidācijas uzraudzība ir kritiska veiksmīgam bioloģiskā farmācijas attīstībai.
Yaohai Bio-Pharma piedāvā aminoskābu oksidācijas analīzes pakalpojumu, kas ļauj jums noteikt aminoskābu oksidāciju, izmantojot dungļu cromatogrāfiju masu spektrometriju (LC-MS).
Mēs esam iesaistījušies dažādu lielu molekulu Strukturālajā Rindinātves Apjoms, tostarp Recombinant Subunit Vaccines, Nanodies/VHHs/Single-domain antibodies (sdAbs), Antikūņu Fragmenti, Hormoni/Peptīdi, Citoķīni, Augšanas Faktori (GF), Enzimi, Kolaženi utt.
Regulatīvās Prasības Aminoskābju Oksidācijai
Saskaņā ar ICH Q6B norādījumiem, oksidētās formas var būt noteiktas un raksturizētas kromatogrāfiski, elektroforetiski un/vai citiem atbilstošiem analītiskajiem metodiem (piem., Augstas Veiktspējas Skalīgā Krāsošana (HPLC), kapilārā elektroforeze, masu spektroskopija, cikliska dihroisms).
Analītiskie metodi
| Analīze |
Metodes |
| Aminokisloto oksidācija |
LC-MS, Reversed-Phase Augstas Veiktspējas Skalīgā Krāsošana (RP-HPLC) vai Hidrofobā Interakcija Augstas Veiktspējas Skalīgā Krāsošana (HIC-HPLC) un masu spektroskopija |
Analītiskie Procedūras
1. Parauga sagatavošana
2. LC-MS
3. Dati analīze
Tryptofāna (Trp) resti ir īpaši nobiedēti oxidēties dēļ tāliņa aromatiskās indoles augstā reaktīvības ar reaktīviem skābekļa veidiem. Trp oxidēšanai nepieciešams kāds Trp restu izklāšanās līmenis, kas parasti ir slēgti proteinam trīsdimensiju struktūrā.
Tomēr, kad Trp resti tiek oxidēti, tie var pārvērsties dažādos produktos ar ļoti atšķirīgām īpašībām salīdzinājumā ar sākotnējo Trp. Biežākā Trp oxidēšanas ceļa ietvaros notiek N-formilkvinērīna formēšanās (Masa starpība: +32).
Vēl viens bieži oxidējamais aminoskaists ir metionīns. Metionīna sēras atomam var pieņemt vai nu vienu vai divus skābekļa atomus, kas noved pie sulfohīda (Masa starpība: +16) vai sulfona (Masa starpība: +32) formas attiecīgi. Šī modifikācija ir salīdzinoši bieža dēļ Met tipiski augstās virsmas izklāšanās līmeņa.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
